猴痘病毒检测试剂盒的检测结果和判定标准

　　猴痘病毒检测试剂盒的组合物由一个引物对和一个探针组成：引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成：探针的序列为序列表中序列3。利用本发明所提供的NASBA试剂盒对猴痘病毒进行检测，具有操作简便，快速、特异的优点。本发明可快速筛查猴痘病毒，对口岸输入性疾病筛查具有重要意义，为防御疾病的传入做好技术支撑和战略储备，满足当前卫生检疫的需求。
 

　　猴痘病毒检测试剂盒检测结果和判定标准：
 

　　试验结果成立的条件：阳性对照PCR反应产物电泳后在301bp的位置上出现特异性条带；阴性对照PCR产物电泳后没有条带，试验结果成立，否则结果不成立。
 

　　结果判断：在试验结果成立的前提下，如果样品PCR反应有特异性的条带，则样品为阳性；反之，为阴性。
 

　　猴痘病毒检测试剂盒性能检测：
 

　　1.PCR检测试剂盒的重复性检测对同一批提取的猴痘病毒阳性模板进行10次PCR扩增，观察试剂盒对同一批次阳性模板扩增的结果。对10批提取的猴痘病毒阳性模板进行PCR扩增，观察试剂盒对不同批次提取的阳性模板扩增的结果。
 

　　2.PCR检测试剂盒的稳定性检测用配制好的检测试剂盒分装后保存在-20℃冰箱中，每隔7d对阳性模板进行PCR检测，连续检测6个月，观察试剂盒在-20℃保存的稳定性。用配制好的PCR反应混合物分装后分别保存在4℃冰箱或室温中，每隔12h对阳性模板进行PCR检测，连续检测4d，观察试剂盒在室温或4℃保存的稳定性。用配制好的PCR反应混合物分装后保存在-20℃冰箱后，分别冻融1~10次后，对阳性模板进行PCR检测，观察冻融次数对试剂盒的影响。