PCR/qPCR耗材选择——材料及颜色篇

目前市场上大多数PCR/qPCR管材选用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一种惰性的有机材料，对反应物质的吸收值最小，并且聚丙烯可以承受PCR过程中的温度变化，在经过温度变化后不易变形，因此可以确保获得最佳的PCR结果。

在生产过程中，为了保证生物兼容性、纯度以及批次间的一致性，应当使用全新的医学级的分子生物学级别的高品质的聚丙烯作为原料进行生产。有些PCR / qPCR板为了配合高通量机器人的操作，需要具有更高强度的边框来配合机器人的抓取，通常情况下边框的材料使用的是更高强度的聚碳酸酯。

在某些PCR过程中，如数字PCR，对于耗材的选择更为严苛。由于数字PCR使用的是有限稀释检测法，因此在操作配样的过程中如果样品吸附在枪头或管壁上，将会造成样本的缺失，从而造成结果的偏差。对于样本稀缺且珍贵的实验中，低吸附度的耗材可以减少材料的损耗，并且可以保证PCR实验的准确性。因此低吸附度的耗材赢得了研究学者的青睐。

PCR管/板有多种颜色，如透明色、白色、黄色、蓝色、红色……普通的PCR过程中，管/板的颜色并不会影响PCR的结果，但是在qPCR中，管/板的颜色对于结果是有很大的影响的。

应用于qPCR的耗材，一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次PCR循环后产物总量，因此与透明塑料管/板相比，白色或磨砂的管/板在应对荧光时表现更为灵敏，并且结果更加准确。这是因为白色的耗材可以阻止荧光折射出管，达到荧光折射的最小化，将更多的荧光信号反射回检测器，从而增加信噪比，表现为更高的灵敏度；另外，白色管壁也可阻止荧光信号被PCR仪的加热模块吸收或进一步反射，从而可以降低重复实验中的误差，提高准确性。除此之外，在进行qPCR时需使用超透明的管盖或光学密封膜来密封PCR管/板，保证荧光不受干扰；还需要参考qPCR的耗材要求，选择最合适的耗材，达到想要的实验效果。