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PCR/qPCR耗材选择——一般特征篇

 更新时间:2023-02-13    点击量:1012

1)规格

常见的PCR/qPCR耗材规格如下

管:0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL

96 孔板:0.2 mL, 0.1 mL

384 孔板:0.02 mL

PCR/qPCR/板的规格决定了反应体积如果加入过多的样品,一方面会导致热传导的效率下降,另一方面会导致样品溢出或者污染;如果加入的样品过少,又会因为频繁的热循环导致水分蒸发,进而导致体系不足、样品损耗,实验出现误差或者无结果。并且选用的耗材需根据PCR仪的加热模块来决定,以求最DA程度的热传导的匹配。

2)高度

PCR/qPCR/板有不同高度的选择,其中“低容(low profile"的管/板意思是说,与普通的管/板相比,它们的高度更低,这样的设计能最大成大的减少反应体系上方的空间,减少了蒸发对体系的影响,并且提高了热传导的效率。因此更推荐优先使用低容的管/板。

3厚度

PCR/qPCR/板要求管壁厚度的一致性,可以保证热传导的一致性。除标准厚度外,目前超薄壁的耗材也受到了广泛的应用,这种超薄壁的管/板管壁厚度约是标准版的50%,可以进一步减少热障,使热传递进行更快,PCR反应更加稳定。

4透明度

对于普通PCR来说,管材的透明度对扩增结果无影响。对于qPCR来说,管身应选择不透明的白色或者磨砂质地的,而管盖或者密封膜则要求具有高度的光学透性,以保证荧光信号传递最佳,并且降低反应中的失真


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