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Polysciences PEI转染试剂配制说明书

 更新时间:2023-05-16    点击量:5399

聚乙烯亚胺(PEI)是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵"(proton sponge)体。PEI,可用作转染试剂,它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。PEI 25K™线性聚乙烯亚胺转染试剂(分子量25000)被证明为转染效率zui hao的PEI转染试剂,下面就以PEI 25K™线性聚乙烯亚胺转染试剂(货号:23966-1/23966-100)为例来说明Polysciences PEI转染试剂的配制过程。

一、产品特性


CAS No
9002-98-6, 26913-06-4分子式(CH2CH2NH)n
熔点
73-75º外观
白色或黄色固体
溶解性

溶于热水,低 pH 值的冷水,甲醇和乙醇;

不溶于:苯,乙mi和丙酮

储存
室温


二、溶液配制

材料:1g PEI 25K™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)、1L 纯水、12 M盐酸、10M氢氧化钠、一次性 0.1-0.2µm PES 真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。

器材:1 L 玻璃烧杯、1 L 玻璃量筒、核准 pH 计、2 支 1 mL 塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯(PTFE)搅拌棒、真空泵配制过程: 

  1. 取1g PEI 25K™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)溶于900ml水中;

  2. 加热到60-80℃并搅拌;

  3. 加入HCl,调节PH 2.0;

  4. 盖上烧杯,搅拌3h,直到PEI 25K™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)粉末wan全溶解为止;

  5. 冷却,直至室温;

  6. 再加入NaOH ,调节pH 6.9-7.1;

  7. 将调节好的溶液移到量筒中,加水至1L;

  8. 真空过滤消毒;

  9. 将消毒好的溶液进行分装,分装好的溶液在-20°C下 保存。

备注:加热/加酸都有利于 PEI 溶解。加酸的时候注意用量,多次少量,达到PEI wan全溶解即可。 

试剂储存:冷冻部分溶液可在-20°C 保存长达一年;部分解冻的溶液可在 4°C 保存2 周,注意不可反复冻融。

粉末储存:未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。

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