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022-66387942serochem PEI转染试剂是一种高性能转染试剂,设计用于稳健、低成本和可扩展的瞬时基因表达。PEI是HEK293和CHO悬浮培养物瞬时转染zui chang用的试剂。下面以PEI Prime为例,来说明serochem PEI转染试剂配制。
一、实验材料:
serochem PEI转染试剂100 mg(Prime-P100-100MG)、100 mL细胞培养级水、10 mL 0.1 M USP级氢氧化钠、(0.1或0.2)μm注射器过滤器、刻度100毫升容器、无菌等分容器(聚丙烯或聚乙烯)
二、实验设备:
分析天平、pH计、生物安全柜或洁净室外壳、过滤设备(如注射器、真空泵)
三、配制流程:
1. 准确称量100 mg PEI Prime,将粉末溶于80mL细胞培养级水中。搅拌几分钟来溶解粉末。
注意:混合后可能会残留微量固体。如果存在,将在稍后的步骤中移除,这些不会影响性能。
2. 逐渐向PEI Prime中加入0.1 M氢氧化钠溶液,同时用pH计监测,将pH调节至7.0 +/- 0.1,在加入氢氧化钠之后充分混合。注意:使用少于10ml的氢氧化钠溶液
3. 添加细胞培养级水,使PEI Prime溶液使总体积达到100ml。
4. 在无菌环境中,如清洁的生物安全机柜或洁净室,对溶液进行无菌过滤,用(0.1或0.2)μm注射器过滤器将溶液无菌过滤到无菌储存容器中。
注意:建议使用PES过滤膜;尼龙膜也可行。
5. 在4°C的温度下给容器贴上标签,可储存长达6个月。
注意:不要冷冻,不要使用冷冻过一次以上的等分试样。