polyplus转染试剂INTERFERin®的应用

polyplus转染试剂INTERFERin®在1nM siRNA下已经提供了非常高的沉默效率，并且可以用于多种粘附细胞和悬浮细胞。使用低浓度的siRNA可以避免脱靶效应，其温和的作用模式确保了更可靠的数据和优异的细胞活力。由于与血清和抗生素的兼容性，INTERFERin®易于使用，也非常适合转染miRNA和其他寡核苷酸，如pre-miRNA、mimic miRNA等。

polyplus转染试剂INTERFERin®应用方向广泛，主要在以下几个方面：

一、RNA干扰机制研究

RNA干扰是由细胞质中的RNA分子介导的，也称为siRNA，意思是“小干扰RNA"。这些siRNA寡核苷酸长21至25个碱基对，其序列与信使RNA（mRNA）特异性互补。siRNA募集RISC复合物（“RNA诱导的沉默复合物"）与其靶mRNA结合，以切割其，从而导致蛋白质表达的沉默（图1）。

图1：细胞中的RNA沉默机制。

二、基因沉默实验在进行动手实验之前，siRNA必须根据研究目标进行设计，并由专门的供应商合成。然后是siRNA转染步骤本身，然后是基因沉

默和/或表型测定的测量。

将siRNA引入细胞会产生一些副作用。这些脱靶效应是通过识别诱导翻译抑制和/或mRNA降解的3'UTR序列产生的，或者通过识

别靶基因以外的mRNA产生的，这两者都会导致细胞中的非特异性沉默。

为了避免脱靶效应，siRNA必须设计有几种算法，以确保精确调整靶向。此外，可以通过使用尽可能低的siRNA浓度来避免非特

异性相互作用。

在分析结果时，确保知道感兴趣的蛋白质和mRNA的半衰期，并在转染后24至96小时测量相应的基因沉默。理想情况下，基因

沉默应该在mRNA和蛋白质水平上进行评估。

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