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ELISA样品制备和采集方法

 更新时间:2023-07-28    点击量:675

不同的细胞或组织,具体的ELISA样品制备和采集方法可能不同,具体的ELISA样品制备和采集方法如下:

血清:使用血清分离管(SST),让样品在室温下凝结30分钟,然后在1000 x g下离心15分钟。立即取出血清并进行测定或等分

试样,将样品储存在≤-20°C的温度下。

血浆:使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30分钟内以1000 x g离心15分钟。立即测定或等分试样,并

将样品储存在≤-20°C的温度下。

贫血小板血浆:使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30分钟内以1000 x g离心15分钟。建议在2-8°C下

对血浆进行额外的10000 x g离心10分钟,以完quan去除血小板。立即测定或等分试样,并将样品储存在≤-20°C的温度下。

细胞培养上清液:以500 x g离心5分钟去除颗粒。立即取出上清液或等分试样进行分析,并将样品储存在≤-20°C的温度下。

组织匀浆:组织匀浆的制备会因组织类型而异。用1X PBS冲洗组织以去除多余的血液,在20 mL 1X PBS中匀浆,并在≤-20°C下

储存过夜。在进行两次冻融循环以破坏细胞膜后,将匀浆以5000xg离心5分钟。立即取出上清液并进行分析。或者,将样品等分

,并在≤-20°C的温度下储存。

细胞裂解物:将细胞溶解在裂解缓冲液中,并在冰上放置30分钟。将试管以14000 x g离心5分钟,以除去不溶性物质。将上清

液等分放入新的试管中,并丢弃剩余的全细胞提取物。使用总蛋白测定法定量总蛋白浓度。立即测定或等分试样,并在≤-20°C

下储存。组织溶解物:用PBS冲洗组织,切成1-2毫米的片,并用PBS中的组织匀浆器匀浆。加入等体积的含有蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲

液,在室温下轻轻搅拌裂解组织30分钟。用离心机清除碎屑。使用总蛋白测定法定量总蛋白浓度。立即测定或等分试样,并在

≤-20°C下储存。

唾液:在试管中收集唾液,并在10000 x g下离心5分钟。收集水层,立即进行测定或等分试样,并将样品储存在≤-20°C的温度

下。

尿液:无菌收集当天的第一个尿液(中流),直接排泄到无菌容器中。用离心机去除颗粒物。立即测定或等分试样,并在≤-20°C

下储存。

母乳:在2-8°C下以1000 x g离心15分钟。收集含水部分,并重复该过程总共3次。立即测定或等分试样,并在≤-20°C下储存。

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