WB实验中条带不跑歪的秘诀

在做 Western blot 实验时，你一定会遇到各式各样的条带，最常见的就是条带跑歪了，如凹型条带、凸型条带、斜条带、条带拖尾等。如何更好的做好WB实验，让我们一起来看看WB实验中条带不跑歪的秘诀吧！

一、凹凸条带的原因和解决办法

可能原因：可能是由于胶未配好（凝胶未能wan全聚合，胶中有颗粒或气泡，凝胶未冷却好，），也可能是电压过高。

解决方法：正确添加质量合格且未过期的 AP 及 TEMED；过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡；凝胶冷却好后再上样；降低电压。

二、条带出现黑点或黑斑的原因和解决办法

可能原因：试剂污染，抗体结合到封闭剂。

解决方法：使用新鲜配置的试剂；过滤封闭液；选用其他类型封闭液。

三、条带中出现边缘规则的白圈的原因和解决办法

可能原因：转膜时膜和胶中间有气泡，或抗体在膜上未均匀分散。

解决方法：制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡；使用摇床孵育抗体。

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