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如何选择蛋白表达系统?

 更新时间:2023-09-11    点击量:870

在蛋白表达系统的相关研究中,从头合成蛋白质并不是一个可行的选择。因此需要借助活细胞或细胞器用作生产和构建蛋白质的工厂。那么你知道该如何选择蛋白表达系统吗?让我们一起来看看吧!

目前,较为主流的表达宿主有大肠杆菌(E.coli)、毕赤酵母(P.pastoris)、昆虫-杆状病毒(Bac-to-Bac系统)以及哺乳动物细胞系(CHOHEK293)等。

一、细菌

优点:

1. 遗传背景清楚;

2. 繁殖快、成本低、抗污染能力强;

3. 表达量高、表达产物分离纯化相对简单、稳定性好;4. 商品化的载体和菌株种类非常齐全、适用范围广等。

缺点:

1. 没有真核转录后加工的功能,没有翻译后修饰;

2. 表达的蛋白质经常是不溶的,容易形成包涵体;

3. 有一些真核蛋白的产量和活性较低;

4. 难以表达大分子哺乳动物蛋白质;

5. 可能会产生一些致热源(内毒素)

二、酵母

优点:

1. 结合了真核和原核的优点,可生产翻译后修饰的分泌蛋白和胞内蛋白;

2. 经济高效,部分真核翻译后修饰,如糖基化,磷酸基化。

缺点:

1. 可能形成不正确的蛋白糖基化;

2. 培养上清多糖浓度高不利于纯化

三、哺乳动物稳定表达系统

优点:

1. 蛋白活性:翻译后再加工修饰折叠的功能产生的外源蛋白质,更接近于蛋白质的天然状态。

2.正确的高级结构(如糖基化)。

3.在蛋白的起始信号、加工、分泌、糖基化方面具有优势,适合表达完整的大分子蛋白。

缺点:

培养基成本高,培养周期长,至少一个月以上,培养较困难,表达量较低。构成复杂、操作技术要求高、表达产量不大、产率低

四、哺乳动物瞬时表达系统

优点:

1. 适度快速表达

2. 很好表达膜蛋白和分泌蛋白

3. 所有蛋白都能进行折叠和最真实的翻译后修饰

缺点:

1. 比较贵

2. 胞内蛋白产量低

总之,各种表达系统各有优缺点,因此,选择表达系统时,应充分考虑各种因素更多有关蛋白表达系统的选择问题,请联系天津益元利康科技有限公司:

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