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细胞转染是如何分类的?

 更新时间:2023-09-28    点击量:621

细胞转染是指将外源性基因导入到细胞内的技术。那你知道细胞转染是如何分类的吗?让我们一起来看看吧!

一、根据导入时间长短进行分类

根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短,可以分为瞬时转染和稳定转染

瞬时转染(transient transfection):指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内,该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。细胞中瞬时转染的外源基因表达时间有限,通常仅持续几天,直到外源基因在细胞分裂过程中因各种因素丢失为止。多用于启动子和其他调控元件的分析。目前,由于各种转染试剂的发明,哺乳动物细胞的瞬时转染已经用于生产具有适当折叠和翻译后修饰的重组蛋白。

稳定转染(Stable transfected):外源DNA整合到细胞基因组中或作为附加体质粒保留在细胞中。与瞬时转染不同,稳定转染能够整合到宿主基因组,因此转染细胞及其子代细胞的基因组中会同时保留转染的DNA。由于稳转效率较低,因此选用有效地转染策略和筛选方法很重要。

二、根据转染方式进行分类

根据转染方式可以分为化学,生物,物理方法细胞由带负电荷的磷脂双分子层构成,这对大分子物质来说是个不可透过的屏障,比如DNARNA的磷酸骨架,其也带负电荷。为了使核酸穿过细胞膜,研究人员开发了多种技术,大致分为三类:

化学方法:利用载体分子包被核酸使其呈现中性电荷或正电荷。如阳离子脂质体方法、磷酸钙共沉淀法、其他阳离子物质介导等技术。

生物方法:利用基因工程病毒转染非病毒基因到细胞中。现在比较多见的是各种病毒介导的转染技术。

物理方法:在细胞膜表面产生一个瞬时的孔从而导入DNA。如电穿孔法、显微注射法。

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