RNA提取的注意事项

一、如何保存提取出的RNA？

提取后溶解于RNase-free Water中，RNA样品建议立即进行下游实验，如需储存，建议分装保存于-80℃。避免多次取用样品，反复冻融。

二、为什么提取的RNA有降解？

1.使用的组织材料不新鲜。提取RNA应采用新鲜的组织材料，或将新鲜组织材料用液氮迅冻后置于-80℃保存。

2.提取RNA时使用的试剂及耗材中混有RNase。

三、RNA分离过程中水相与有机相分离不全，提取的RNA含量低。

可能是氯仿混合不充分，离心时转速不够或离心时间太短。使得回收的RNA水相低于500 µL。

四、如何防止提取RNA过程中RNA的降解？

1.实验过程中使用的玻璃器皿使用前可于180 ℃干烤8 h以上，塑料制品要用氯仿冲洗。焦磷酸二乙酯（DEPC）是RNase的强烈抑制剂，RNA提取过程和逆转录过程中所用的水用DEPC处理；

2.实验人员的手为RNase的重要污染源，进行RNA实验时应始终戴手套，并应勤换手套；

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