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022-66387942一、苯酚-氯仿抽提法
苯酚和氯仿是常见的有机溶剂,一般可以用来将蛋白杂质从DNA样本里去除。基本原理是,有机溶剂会使杂质蛋白变性,并将杂质蛋白留在有机溶剂层,而DNA分子是有水溶性的,所以会进入水溶液层。这样DNA和杂质蛋白就被分开了。这个方法的好处是便宜有效,特别是在提取基因组DNA时,要去掉许多从细胞裂解液中带来的蛋白,苯酚法十分好用但苯酚和氯仿是有毒溶剂,而且有可能会残留在提纯过后的DNA样本中,对后续反应造成影响。
二、乙醇沉降法
乙醇沉降法其实就是一种盐析方法。盐阳离子(一般是Na+、醋酸钠盐)和70%的乙醇加入到DNA样本中后,阳离子与带负电的DNA骨架相互作用,从水分子那里将DNA抢夺出来,而乙醇改变了DNA的结构,使得DNA聚合最终沉降。
三、磁珠吸附法
原理是在携带正电的磁珠和DNA分子特定结合后,磁珠被固定在磁极上,DNA样本中的其他杂质在此时被移除,而后使用高pH的洗出液使得磁珠带负电,因此DNA分子又会脱离磁珠,被洗出。
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