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022-66387942酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技术从1970年代发展至今已近半个世纪,是一项实验室最基本的免疫检测技术,被广泛的应用于基础研究和临床检验。那么面对市面上数以千计的试剂盒,数百家供应商,该如何选择适合的ELISA试剂盒呢?让我们一起来看看吧!
一、明确研究种属
一般来说,厂家都会在产品名称上标明种属,且为shou个单词,检索种属的常用语言为英文。
如果您需对不同物种的同一因子进行定量,建议优先寻找适用于多个种属的 ELISA 试剂盒,产品介绍中会注明「Multi-species」。
二、明确样本类型
不同厂家验证样本类型不同,即使同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本,根据样本处理方式的差异,分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆,因此购买前需仔细核对。
三、预测目标因子的浓度
一般来说,待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围,且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6,正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL,病人会显著增高,CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。
因而,必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。
若浓度太低,可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大,建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。
四、检查试剂盒进行过哪些质控
质控数据在说明书中即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等,每个数据最好都看一下,确保chao强的结果重现性及准确性。
五、确定需检测的因子数量
如果待测因子超过 5 个,且样本量较小时,单因子 ELISA 检测方法并不是最jia选择。
建议考虑多因子检测方法,如固相芯片(样本数量一般 5 个以内,检测指标可达上百个)及 Luminex 液相芯片方法 (检测样本多达 80 个,检测指标多达 50 个)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。
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