夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么？

ELISA的原理是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。那么你知道夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么吗？让我们一起来看看吧！

一、夹心法原理

夹心法使用的是两个抗体夹抗原或者两个抗原夹抗体的方法，这种复合物被称之为三明治夹心结构，利用一对配对wan全的抗体，可以特异性检测抗原，当然主要针对的是具有至少2个以上抗原表位的抗原，抗体的配对可是门技术活，很多公司可以生产抗体，但是配对却很少做，主要原因在于筛选的难度，可能开发的几十株针对同一抗原的抗体，都很难有一对合适的可以配对，原因是多方面的，有抗原的表位、构象等原因，也有抗体效价的原因，当然还有筛选成本的原因，所以每一个ELISA试剂盒都是经过多次和长期的验证得来的。

二、竞争法原理

竞争法的使用相对来说就窄一点了，其原理是利用抗原抗体结合的可逆性，但在合适浓度时又可达到结合和解离的稳定期，那么亲和力更强的抗体自然就能更有效的结合抗原了。一般结合的解离使用最多的就是SPR和BLI技术了，可以高精度或高通量的测抗原/抗体、受体/配体的亲和力。

利用已知的抗原进行标记（抗原A），作为对照，实验组加入样本（抗原B）及标记抗原，与对照组相比，显色低，则该抗原A与抗原B竞争结合抗体，这种方法一般用于抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化抗原。

包被抗体进行竞争法呢，一般用于ADA，竞争、非竞争抗体鉴定/筛选，抗体的竞争筛选是有效的免疫原性检测手段之一。

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