二代测序（NGS）的原理

　　DNA测序技术一直是分子生物学相关研究中常用的技术手段之一，从一定程度上推动了该领域的快速发展。每一代测序技术的更替都标志着生物学中基因芯片、数据分析、表面化学、生物工程等技术领域有了新的突破，使测序向着高通量、低成本、高安全性和商业化的方向发展。那么二代测序(NGS)的原理是什么？让我们一起来看看吧！
 

　　第二代测序(NGS)又称为高通量测序(High-throughputsequencing)，是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。二代测序引入了可逆终止末端，从而实现边合成边测序。二代测序在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记来确定DNA的序列。由于在二代测序中，单个DNA分子必须扩增成由相同DNA组成的基因簇，然后进行同步复制，来增强荧光信号强度从而读出DNA序列；而随着读长增长，基因簇复制的协同性降低，导致碱基测序质量下降，这严格限制了二代测序的读长，因此，二代测序具有通量高、读长短的特点。
 

　　NGS技术因其高效和低廉的单碱基测序成本为临床应用提供了不可估量的前景优势，尤具相对传统的Sanger测序法其每次产生的数据量几乎是天文数字，加之信息科学的持续发展，使得对这样的大数据进行有效的处理已成为现实。目前NGS技术已应用在分子诊断、遗传分析、病原物生物等方面。
 

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