如何选择免疫组化中的一抗？

免疫组化实验看似容易，但真想把结果做漂亮，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。一味按照网上操作流程来做，结果往往并不理想，最终结果未能达到预期的效果。那么如何选择免疫组化实验中的一抗呢？让我们一起来看看吧！

一、单克隆和多克隆抗体的选择

存在于抗原表面的，决定抗原特异性的特殊化学基团称为抗原决定簇，又称抗原表位。一个抗原可以有一种或多种不同的抗原表位，每种表位只有一种抗原特异性。

用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个 B 细胞克隆产生针对多种抗原表位的抗体，就是多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）。由单一 B 细胞克隆产生的识别一种抗原表位的抗体，称为单克隆抗体（monoclonal antibodies, mAb）。

在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，切片和细胞染色产生的背景信号更少，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，因为不依赖单一表位，因此其对微小抗原变化（例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性）的包容性更强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。

二、应用范围的选择

有的一抗只能用于 WB ( Western blotting）或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等，必须选择能做免疫组化的抗体。

三、适用种属的选择

这一点很重要，你的目的是检测哪个种属样本，就必须选择能检测该种属的抗体，因为抗体在不同种属间存在差异。

四、宿主来源

宿主来源，一般兔来源的多是多克隆，也有兔单克隆；而小鼠来源的多是单克隆。需要根据一抗宿主来源来选择相应的二抗。

更多有关免疫组化实验中一抗的选择问题，请联系天津益元利康生物科技有限公司：