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如何选择DNA提取方法

 更新时间:2023-10-25    点击量:627
  DNA的提取可以简单的分为裂解和纯化两大步骤,裂解是破坏样品细胞结构,从而使样品中的DNA游离在裂解体系中的过程,纯化则是使DNA与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质分离的过程。那么该如何选择DNA提取方法呢?让我们一起来看看吧!
 
  一、酚氯仿抽提法
 
  酚氯仿抽提是去除蛋白质的有效手段,但如果蛋白质含量超过了其饱和度,裂解体系中的蛋白质就不会被一次性去除,需要进行多次反复抽提,而每次的抽提均会导致核酸的损失。酚氯仿抽提的优势是成本低廉,对实验条件要求较低。二、高盐沉淀法
 
  高盐沉淀法是酚氯仿抽提方法的一个变种,其省略了酚氯仿抽提操作的麻烦,并且克服了酚氯仿抽提方法的缺点,只是得到DNA的纯度不够稳定。
 
  三、柱式法
 
  过柱法利用某些固相介质,在某些特定的条件下,选择性地吸附核酸而不吸附蛋白质及盐的特点,实现核酸与蛋白质及盐的分离,是目前试剂盒提取广泛使用的方法。
 
  离心柱法DNA提取它的优点是比传统的酚氯法提取的纯度高,有利于RNA保护,而且能进行微量操作,以其低廉的价格和相对便捷的操作,渐逐取代了传统DNA提取方法,被高校科研所等市场普遍接受。
 
  四、磁珠法
 
  该方法将纯化介质包被在纳米级的磁珠表面,通过介质对DNA的吸附,在外加磁场的作用下使DNA附着于磁珠并定向移动,从而达到核酸与其它物质分离的目的。磁珠法的优势是高质量、高通量满足如今对核酸提取效率的需求;灵敏度高(只需微量的样本);分离速度快(磁场分离只需几秒钟);
 
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