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022-66387942你知道琼脂糖凝胶电泳实验的实验方法是什么吗?有什么注意事项呢?让我们一起来看看吧!
一、琼脂糖凝胶电泳实验方法
1. 择适合样品预期片段大小的琼脂糖凝胶浓度百分比。将琼脂糖粉末与用于运行凝胶的相同类型的缓冲液(TAE)结合起来,加热使混合物融化,避免沸腾。
2. 选择所需尺寸的凝胶浇注模具和梳子,为样品和marker提供足够数量的孔,以及容纳每个待装样品数量的孔容量。
3. 胶凝固后,将凝胶放入电泳仪中,电泳液没过凝胶,根据加入量的多少,决定混合多少ul的loding buffer,将样液混合loding buffer用移液枪加入到凝胶中。
4. 盖上盖子,确保电极和盖子的方向正确,注意正负极, 打开电泳仪 ,设定凝胶运行的时间和电压,根据样品大小确定运行时间。
二、琼脂糖凝胶电泳实验注意事项
1. 琼脂糖凝胶溶液配制时总液体量不宜超过锥型瓶50%容量。
2. 加热时可以中途摇动摇动,防止琼脂糖凝胶凝在锥形瓶底部。
3. 注意不要损伤梳底部的凝胶。防止加样时样品漏出。
4. 凝胶浓度越低,分辨的片段越大;凝胶浓度越高,分辨的片段越小。
5. 使用紫外透射仪观察,紫外光对DNA 分子有损伤作用,不可长时间照射。从胶上回收DNA时,应尽量缩短光照时间以减少紫外光切割DNA。
6. 紫光灯下观察时应戴上防护镜,以免损伤眼睛。
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