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琼脂糖凝胶电泳实验的试验方法是什么?注意事项有什么?

 更新时间:2023-10-25    点击量:843

你知道琼脂糖凝胶电泳实验的实验方法是什么吗?有什么注意事项呢?让我们一起来看看吧!

一、琼脂糖凝胶电泳实验方法

1. 择适合样品预期片段大小的琼脂糖凝胶浓度百分比。将琼脂糖粉末与用于运行凝胶的相同类型的缓冲液(TAE)结合起来,加热使混合物融化,避免沸腾。

2. 选择所需尺寸的凝胶浇注模具和梳子,为样品和marker提供足够数量的孔,以及容纳每个待装样品数量的孔容量。

3. 胶凝固后,将凝胶放入电泳仪中,电泳液没过凝胶,根据加入量的多少,决定混合多少ulloding buffer,将样液混合loding buffer用移液枪加入到凝胶中。

4. 盖上盖子,确保电极和盖子的方向正确,注意正负极, 打开电泳仪 ,设定凝胶运行的时间和电压,根据样品大小确定运行时间。

二、琼脂糖凝胶电泳实验注意事项

1. 琼脂糖凝胶溶液配制时总液体量不宜超过锥型瓶50%容量。

2. 加热时可以中途摇动摇动,防止琼脂糖凝胶凝在锥形瓶底部。

3. 注意不要损伤梳底部的凝胶。防止加样时样品漏出。

4. 凝胶浓度越低,分辨的片段越大;凝胶浓度越高,分辨的片段越小。

5. 使用紫外透射仪观察,紫外光对DNA 分子有损伤作用,不可长时间照射。从胶上回收DNA时,应尽量缩短光照时间以减少紫外光切割DNA

6. 紫光灯下观察时应戴上防护镜,以免损伤眼睛。

更多有关琼脂糖凝胶电泳的实验方法与注意事项,请联系天津益元利康生物科技有限公司。


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