什么是液体培养基？它的组分有哪些？

细胞培养，是人工创造与体内生长相似的环境，使细胞生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。培养基是一切体外培养的基础，为细胞的生长和代谢活动提供了各种必需的营养物质。根据培养基的来源和组成成分，它的发展经历了三个阶段，分别是天然培养基阶段、合成培养基阶段以及无血清培养基阶段。那么你知道什么是液体培养基吗？它的组分是什么吗？让我们一起来看看吧！

在20世纪50年代，当时体外培养普遍直接采用组织凝块、生物性液体和组织提取液，如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸液等，这就是天然培养基阶段。由于天然培养基的使用会带来不可避免的病毒污染、批次间差异大等问题，于是就有了合成培养基，其主要成分包括生长因子、营养物质、缓冲剂、抗生素等。合成培养基最初的配方是MEM，由Eagle在1959年shou次提出，之后经过不断发展涌出了各种不同配方的优质合成培养基，包括M199、DMEM、IMDM、PRMI1640等，这些经典培养基到现在依旧是实验室中应用zui广泛的。

按照物理性质可将其分为：液体培养基、固体培养基、半固体培养基、脱水培养基。其中，液体培养基最为常见，它具有可进行通气培养或振荡培养的优势，因为它的流动性便于精确控制培养基的溶液温度、营养浓度和气体含量等；它对细胞生长时的附着能力要求小，细胞可快速扩增；当需要大量细胞培养时也更经济高效。作为大家使用最为频繁的细胞培养试剂，基础液体培养基在细胞培养中起到关键作用。

基础液体培养基的组分

为了满足细胞的生长需要，液体培养基一般都会含有水、能源物质、氨基酸、维生素、无机盐和pH指示剂等。此外，还可能含有血清或血清替代成分。

（1）水

液体细胞培养基中90 %以上的成份是水。细胞对水的品质非常敏感，水的品质将直接影响细胞培养的效果。因此，细胞培养用水须经过纯化，品质应符合中国药典注射用水标准或者超纯水的标准。

（2）能源物质

液体培养基的能源物质以葡萄糖为主，少数含有半乳糖、果糖、甘露糖等。根据葡萄糖含量不同区分，代谢消耗较快的病理状态细胞多选用高糖（4.5 g/L）培养基，单抗细胞融合时使用低糖（1.0 g/L）培养基。当葡萄糖不足时，可以使用丙酮酸钠为细胞提供碳源，并且部分细胞系对丙酮酸钠具有依赖性。

（3）氨基酸

氨基酸是蛋白质合成的基础，不同细胞需要的氨基酸类型具有差异性。谷氨酰胺是一种氨基酸，也是一种重要能源物质，但要注意它在溶液中不稳定，代谢产物会损伤敏感细胞系。

（4）维生素

维生素参与酶构成，是维持细胞生长的生物活性物质，在细胞代谢中起调节及控制作用。

（5）无机盐

无机盐的主要作用就是维持渗透压平衡，调节pH。

（6）缓冲体系

细胞培养过程中造成培养基 pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2，液体培养基通常采用NaHCO3或HEPES缓冲体系来为细胞生长提供稳定的pH环境。

（7）酚红：酸碱指示剂。

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