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022-66387942无菌操作或是说无菌操作技术在医疗护理或微生物检验过程中是bi不可少的技术。那么你知道无菌操作的注意事项有哪些吗?让我们一起来看看吧!
一、擦拭
实验过程中需要擦拭的对象有工作台面、手套、瓶皿/孔板表面、耗材/器械表面。
对于工作台面,在实验开始前、结束后都需要试用70%乙醇擦拭,如果实验过程中出现液体滴落在台面,也需要擦拭台面后才能继续实验;
对于手套,除了佩戴一次性灭菌处理过的手套外,整个实验过程都应间隔一段时间就擦拭手套一次;
对于瓶皿/孔板,如果实验过程中被拿出过生物安全柜范围以外,那么再次放回生物安全柜或培养箱之前,都应该用70%乙醇进行外表面擦拭;
对于耗材/器械表面,如果是一次性耗材,触碰了实验台面、或其他实验耗材/器械/手套等的外表面,都应该扔弃不再试用;如果是非一次性的器械,出现上述误触,则应该立即用70%乙醇擦拭整个可能被污染的区域。
二、加盖
对于需要反复使用的含盖的器皿,当实验结束后,清洗瓶盖时,应该注意彻di清洁瓶盖内侧,包括含橡胶垫的部分。
有条件的实验室,可以在器皿盖上盖子后,使用70%乙醇擦拭外表面,然后再通过外层包裹锡箔纸的方式,来尽可能降低外部环境灰尘沉积在盖子和器皿之间缝隙的现象。
三、灼烧
灼烧是一种可以去除颗粒性灰尘或棉绒的有效办法,火焰也会造成附近的气流上升,避免灰尘沉降。但是,在生物安全柜内,点燃酒精灯进行灼烧是不合适的。生物安全柜工作时,会为内部空间提供一个稳定的层流,但酒精灯的火焰会对它产生干扰,进而影响内部的无菌环境,提高了生物污染的风险。
四、移液
移液部分,我们分为小体积移液、大体积移液和溶液倾倒转移来讲解。
对于小体积移液,一般特指小于1mL的液体转移,因为其体积小,通常需要使用移液器来操作。而小体积的移液吸头比较短,在吸液的过程中有可能出现移液器下端也进入瓶皿内部的情况。此时就需要特别注意,不能让移液器碰触到瓶皿内壁,如果碰触了,则应该立即使用70%乙醇清洁移液器下端,然后才可以继续往下进行实验操作。对于大体积移液,例如5/10/25mL或以上的液体转移,可以用大量程的移液吸头或大量程的电动移液器辅助移液。
但不管是什么体积的移液,都应该确保吸头或移液管的末端内是含有棉花或透气胶塞的,这样可以有效避免因为移液过程中,液体吸入移液器内部造成污染。
但由于大体积移液的液体转移速度快、量大,有时候即使有棉花,也会出现液体被吸入移液器内的现象,这时就只能停止实验,或改用其他未被污染的移液器来操作了。关于溶液倾倒,有时液体的转移不需要特别精准,会把溶液从一个瓶内直接倒入另一个瓶内或管内。
在操作时,需要注意溶液从原来的容器中倒入新的容器时,瓶口应保持悬空,而不是直接接触新容器的瓶口边缘来完成液体转移。因为后者会容易出现液桥,即液体在两个挨得很近的接触面之间形成的水柱,这样的水柱容易被微生物进入;同时,在倾倒的时候也要注意不要让液体流淌在容器的外表面,因为这样也会提高微生物污染的风险。
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