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022-66387942流式细胞术的测定对象是单细胞或单个微粒,在FCM技术中能够制备出合格的单细胞悬液是非常重要的环节,单细胞悬液来自于动植物的不同组织器官,也可来自于非生物样品,FCM中大多数为生物样品,生物样品主要来源于培养细胞、血液、新鲜实体组织以及石蜡包埋组织等,不同的组织有不同的单细胞分散方法,因此建立切实可行的FCM单细胞悬液的具体制备方法,在流式细胞分析中至关重要。那么你知道流式细胞术的样品制备方法有什么吗?让我们一起来看看吧!
一、酶消化法
酶的作用原理主要有三方面:一是破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等,二是水解组织细胞的紧密连接结构的蛋白质,三是水解组织间的粘多糖物质。酶消化法是实体组织分散为单细胞的主要方法之一。
二、机械法
机械法分散实体组织包括:用剪刀剪碎组织或用锋利的解剖刀剁碎组织,用匀浆器匀浆,用细注射针头反复抽吸细胞等,最后用300目尼龙网过滤细胞得到单细胞悬液。
三、化学处理法
化学处理法的主要原理是:将组织细胞间起粘连作用的钙、镁离子置换出来,从而使细胞分散下来。
四、石蜡包埋组织单细胞悬液制备
石蜡包埋组织单细胞悬液的制作方法的建立扩大了流式细胞术的应用范围,并有大量临床随访资料,因此非常有利于进行回顾性研究和利用。下面介绍常用石蜡包埋组织单细胞悬液制备方法。
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