蛋白质纯化的原理是什么？

蛋白纯化是指通过基因工程技术将编码蛋白的核酸序列导入到宿主细胞，使其大量表达，再使用适当的纯化方法将其在体外纯化出来，从而获得高纯度、活性和产量的蛋白质。蛋白质表达系统可以分为原核表达系统和真核表达系统两大类。那么你知道蛋白质纯化的原理是什么吗？让我们一起来看看吧！

一、乳糖操纵子的负调控

在没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态，此时，I序列表达Lac阻遏蛋白与O序列结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结合，抑制转录启动。当有乳糖存在时，乳糖进入细胞，经β-半乳糖苷酶催化，转变为异乳糖，异乳糖结合阻遏蛋白，使蛋白构象变化，导致阻遏蛋白与O序列解离，从而启动转录。

异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用与异乳糖相同，是一种作用ji强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。

二、宿主菌株的选择

（1）BL21是zui常用于原核表达的菌株之一，主要适用于非毒性蛋白的表达，具有大肠杆菌聚合酶，故可适用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，pMAL质粒）。

（2）BL21(DE3)在BL21菌株的染色体上整合了λ噬菌体DE3区的T7噬菌体RNA聚合酶基因，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的表达。

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