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022-66387942Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)培养基作为细胞培养领域的重要组成部分,其配方的设计直接关系到细胞在体外环境中的生长和繁衍。本文将剖析DMEM培养基的配方,逐一解读其中每一成分的作用,为科研人员提供详实的培养基配方指南。
DMEM培养基配方成分详解:
★基础培养基:
DMEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持多种不同的哺乳动物细胞生长。原始的DMEM培养基配方中葡萄糖浓度为(1 g/L),DMEM高糖培养基包含4500 mg/L的D-葡萄糖,其提供了培养基的基础结构,是营养的主要来源。
★缓冲剂:
碳酸氢钠缓冲系统(3.7 g/L),其使得DMEM高糖培养基能够5–10% CO2的环境来维持生理pH值。
Hepes缓冲液:调节培养基的pH值,确保适宜的酸碱平衡。
★氨基酸和维生素:
L-谷氨酰胺是细胞生长的必须氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源,能促进细胞生长,有助于细胞存活;
L-胱胺酸(Cystine)为蛋白质和氨基酸代谢提供基础。
L-蛋氨酸是转甲基化和转硫的前体。
维生素B群、维生素C和维生素E可满足细胞对维生素的需求。
抗生素(通常为青霉素和链霉素)可预防微生物污染。
★生长因子(可选):
表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF):可根据需要添加,促进特定细胞类型的增殖。
如果需要,可以在DMEM中添加生长因子。但是添加的生长因子类型和数量应根据特定的细胞类型和实验需求来确定。是否在DMEM中添加生长因子,以及添加哪种生长因子,取决于实验的具体需求和实验目标。
以上仅列出DMEM培养基部分配方成分,对不同细胞培养,可以根据细胞特性自行调整DMEM培养基配方。通过深入理解DMEM培养基的配方,科研人员可以更好地根据实验需求进行调整,为细胞提供精准、有针对性的培养环境。中科百抗的DMEM培养基包含4.5 g/L葡萄糖、酚红、L-谷氨酰胺和110 mg/L丙酮酸铵,以磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为缓冲液,不含有蛋白质、脂质或生长因子的配方,因此在使用时需要额外补充10%的胎牛血清(FBS),以确保细胞得到充足的营养和生长所需的支持。