保存蛋白质的原则及方法有哪些？

在完成蛋白质纯化后，如果保存不当，容易发生失活和变性的情况，那么你知道保存蛋白质的原则及方法有哪些吗？让我们一起来看看吧！

一、原则

1. 低温

保存蛋白质时，确保在低温条件下至关重要。低温意味着较低的能量水平，有助于减缓蛋白质分子内部的热运动，减少键的断裂可能性。此外，在低温下，微生物繁殖减缓，潜在的蛋白酶活性降低，从而有助于维持蛋白质的活性。

2. 无菌

在进行蛋白质实验操作时，务必佩戴手套。尽管实验室戴手套通常是为了保护实验者自身，但在生化实验中，蛋白质是我们需要保护的主体。我们皮肤上存在一些蛋白酶，可能会降解蛋白样品。此外，皮肤上的其他化学物质也可能污染蛋白样品。为了防止细菌生长，最好将蛋白质保存在经过灭菌处理的容器中。

3. 浓度

为了提高蛋白质的稳定性，建议以较高浓度保存重组蛋白质，最好保持在1mg/ml以上。高浓度有助于防止蛋白质分子附着在塑料或玻璃管壁上。不容忽视的是，疏水性蛋白质容易附着在管壁上。

4. 分装

蛋白质需要冷冻保存，但在实验中常在室温或更高温度使用。反复冻融过程中产生的冰晶会损害蛋白质的结构和构象。为减少冻融次数，建议将纯化后的蛋白质进行分装保存，每次使用前融化所需量，以确保蛋白质样品经历单次冻融。

二、保存

1. 长期保存

对于冻干状态的重组蛋白，由于处于wan全脱水的状态，在不受潮的情况下可以在冰箱中保存数年。

对于复融后的重组蛋白，比较合适的保存方式是分装后保存在 -20°C 或 -80°C，六个月内一般是没有问题的。

（1）分装有助于zui大程度减少反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害，并减少从同一管中多次吸取可能导致的污染。

（2）分装的量最好按一次实验用完为准，每份至少不能少于10 µl。体积越小，蛋白浓度受蒸发和管壁吸附影响的可能性越大。

（3）复融后的分装重组蛋白如果一次用不完，将剩余母液保存在 4℃，避免再冻起来。

（4）蛋白工作液应当在当天配制并当天使用，最好不要在4℃超过1天。

2. 短期保存

对于短期保存，大多数蛋白质可以在4°C下保存，以避免反复冻融对活性的影响。然而，4°C保存面临微生物污染的问题。因此，如果保存时间超过24小时，建议使用0.22微米的滤膜过滤样品，然后在无菌管中保存。值得注意的是，并非所有蛋白质都适合在4°C下保存。

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