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022-66387942细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
BAMBANKER是一种含DMSO的无血清细胞冻存液,无不明动物源成分,高质量标准为实验效果带来保证。不需要进行程序降温,可在-80℃长期保存细胞(肿瘤细胞和常规细胞)。那么你知道BAMBANKER® 无血清细胞冻存液冻存细胞的方法吗?让我们一来看看吧!
一、冻存操作步骤
①从恒温箱中取出培养中处于对数增殖期的细胞。
冻存对数增殖期的细胞,是可以确保细胞良好生存率中最重要的一点。
②使用部分细胞用台盼蓝染色并计数细胞数量。
③将培养液移至离心管中,在规定条件下进行离心。
④去除上清液后,将杂质颗粒通过旋涡操作进行悬浮。
⑤每个冻存容器中细胞数要保持规定浓度,然后再添加冻存液。(每 1mL 冻存液可容纳 5×105-1×107 个细胞)
之后的操作步骤尽可能快速完成。另外,冻存液从冷藏柜取出后,尽快进行保存处理
⑥无需预冷细胞悬浮液,直接置于-80℃下保存。
若储存在冷冻处理容器 bicell中,效果更佳。
⑦保存液氮时,先在-80℃保存 12 小时(超过一晚),待状态稳定后在移至液氮中保存。
转移细胞时请尽快完成操作。
二、解冻操作步骤
①在 37℃恒温箱(或者水浴锅)等设备中解冻细胞,确认细胞液wan全融解。
此操作需迅速进行。因为细胞在解冻过程过极易受到损坏。
②将细胞液注入到 10mL 的清洗液(培养液)中,混合wan全后在规定条件下进行离心
(比如:300~400×g;半径 21cm 转子 1200rpm)
③去除上清液后,将杂质颗粒通过旋涡操作进行悬浮。
④加入培养液后混合wan全后,将其中一部分细胞用台盼蓝染色并计数细胞数量。
⑤将培养液转移至培养容器中,恒温箱内静置培养。
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