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022-66387942细胞培养技术对于生产病毒性疫苗和其他生物技术产品至关重要。细胞传代是细胞培养bi不可少的过程,对于贴壁细胞,传代时首先需进行细胞分离。胰蛋白酶(胰酶)是常用的消化酶,可使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。胰酶可在胰腺中大量获得,且易提纯,因此在各种细胞培养过程中得到广泛应用。那么你知道中科百抗Neptry胰酶细胞消化液的应用与注意事项有什么吗?让我们一起来看看吧!
中科百抗NeptryTM消化液是一种胰蛋白酶类似物(Trypsin Like Enzyme),是一种通过生物工程制备的非动物源性重组蛋白酶,与胰蛋白酶有相似的解离动力学,稳定性更高,纯度更好,消化更温和,细胞毒性更低。目前主要应用于细胞培养中,可以在赖氨酸和精氨酸的C末端切割肽键,可以替代猪或牛胰蛋白酶(Trypsin)对贴壁细胞的消化解离。生物制药中,GMP级别的NeptryTM能够为疫苗生产、病毒载体生产提供高质量和高性价比的贴壁细胞消化解决方案。
NeptryTM消化液与胰蛋白酶具有类似的功能,由大肠杆菌(E.coli)重组表达,GMP条件生产,在性能和储存上可wan全替代传统动物源胰酶,让细胞消化更加高效便捷。产品主要应用方向:
1.用于组织块的消化解离和原代细胞的获取;
2.用于贴壁细胞的传代消化和收获;
3.用于微载体方法培养的细胞消化和收获;
4.用于疫苗生产过程中一些贴壁宿主细胞的消化,低血清或无血清的环境下,弱贴壁细胞及干细胞在传代过程中的消化。
使用Neptry消化液注意事项:
1.在使用过程中注意避免消化液被细菌污染;
2.消化的时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差,做流式时的CD Marker也会下降;
3.消化液进行分装时需分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。;
4.在低血清或无血清的环境下,弱贴壁细胞及干细胞在传代过程中的消化效果主要取决于pH值、温度、消化液浓度、组织块大小和硬度。
5.酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明酚红可以模拟固醇类激素的作用,为避免固醇类反应,培养细胞特别是哺乳类细胞时,需用不加酚红的培养基。
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