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碧云天脂质氧化MDA检测试剂盒(S0131S)现货供应

 更新时间:2024-03-04    点击量:710

碧云天的脂质氧化MDA检测试剂盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)是一种用于测量脂质氧化水平的试剂盒。它采用一种基于MDA和硫代ba比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应的显色方法来产生红色产物,然后通过比色法对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中的MDA进行定量检测。这种试剂盒被广泛应用于脂质氧化水平的检测。

MDA(丙二醛)是生物体脂质氧化的天然产物。当动物或植物细胞经受氧化应激时,脂质氧化便发生。脂肪酸在氧化过程中会逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过测量MDA的水平,我们可以了解脂质氧化的程度,因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化水平的指标。除了氧化应激反应外,生物体内的其他生化反应也会产生MDA,例如thromboxane synthase也能催化其产生,但只要在测定时设置适当的对照,就能观察到脂质氧化水平的变化。

以碧云天的脂质氧化MDA检测试剂盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)为工具,通过检测MDA水平,可以准确评估生物体的脂质氧化程度。这种试剂盒符合脂质氧化水平检测的需要,并且在科学研究和临床应用中得到广泛应用。

使用说明:

1. 样品的准备:

a. 血浆、血清或尿液样品制备后可以直接用于MDA测定。

b. 组织或细胞可以使用PBS裂解液进行匀浆或裂解。对于组织,组织重量占匀浆液或裂解液的比例为10%;对于细胞,每100万细胞使用0.1ml裂解液或匀浆液。匀浆或裂解后,10,000g-12,000g离心10分钟取上清用于后续测定。对于一些特殊样品,离心不能获得澄清的上清溶液的,可以使用0.2微米孔径的过滤器过滤以获得澄清的样品溶液。匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或4℃进行操作。

2. 试剂盒的准备工作:

a. TBA储存液的配制:称取适量TBA,用TBA配制液配制成浓度为0.37%的TBA储存液。例如18.5mg TBA用5ml TBA配制液配制,或者25mg TBA用6.76ml TBA配制液配制,最终浓度即为0.37%。TBA配制液需wan全溶解后再使用,可以加热到70℃以促进溶解。TBA储存液较难溶解,需加热到70℃,并通过剧烈Vortex以促进溶解。配制好的TBA储存液室温避光保存,至少3个月内有效。

3. 样品测定:

a. 在离心管或其它适当容器内加入0.1ml匀浆液、裂解液或PBS等适当溶液作为空白对照,加入0.1ml上述不同浓度标准品用于制作标准曲线,加入0.1ml样品用于测定;随后加入0.2ml MDA检测工作液。

b. 混匀后,100℃或沸水浴加热15分钟。加热时务必注意避免液体暴沸溅出。如果使用加热块(Heat block)进行加热注意用重物压紧离心管盖;如果使用沸水浴,则需使用可把盖子锁死的离心管或螺旋盖离心管,或用Parafilm封住离心管口,用针头刺一小孔。zui方便和准确的加热方法是使用带有热盖并可以加热0.5ml PCR管的PCR仪。

c. 水浴冷却至室温,1000g室温离心10分钟。取200微升上清加入到96孔板中,随后用酶标仪在532nm测定吸光度。如果不方便测定532nm的吸光度,也可以测定530-540nm之间的吸光度。可以设定450nm为参考波长进行双波长测定。

d. MDA含量的计算:对于血浆、血清或尿液等样品可以直接根据标准曲线计算获得MDA的摩尔浓度,对于细胞、或组织样品,计算出样品溶液中的MDA含量后,可以通过单位重量的蛋白含量或组织重量等来表示最初样品中的MDA含量,例如μmol/mg蛋白或μmol/mg组织。

产品选购:

货号

产品名称

规格

S0131S

脂质氧化(MDA)检测试剂盒

100

 


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