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022-66387942限制性内切酶(restriction endonuclease,REases)是一种能够识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并在特定位置切割DNA链中的磷酸二酯键的一类酶,简称限制酶。下面让我们一起来看看NEB限制性内切酶AlwI(R0513S)的产品介绍吧!
NEB限制性内切酶AlwI是一种可识别GGATCNNNN^N_ 序列的限制性内切酶,来源于大肠杆菌菌株,携带有克隆自洛菲不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)(R. Morgan)的 AlwI 基因。NEB酶AlwI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基突出的 5´ 末端,它比平末端更难连接。该酶对dcm甲基化和CpG甲基化不敏感,dam 甲基化阻断该酶酶切。对于不能热失活的酶,NEB建议进行柱纯化,或脂糖凝胶电泳后切胶回收,或酚/氯仿抽提。
优化限制性核酸内切酶反应:
在建立限制性核酸内切酶消化物时,需要考虑几个关键因素。在正确的反应体积中使用适量的DNA、酶和缓冲液组分,可以达到最佳消化效果。根据定义,1 单位的限制性内切酶将在 60 分钟内在 50 μl 反应中wan全消化 1 μg 底物 DNA。这种酶:DNA:反应体积比可用作设计反应的指南。然而,大多数研究人员遵循列出的“典型"反应条件,建议过度消化 5-10 倍,以克服 DNA 来源、数量和纯度的可变性。
产品选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
R0513S | SAlwI | 500 units |