Elabscience乙醛脱氢酶(ALDH)比色法测试盒(E-BC-K565-M)现货供应

Elabscience乙醛脱氢酶(ALDH)比色法测试盒适用于检测动物组织、血清(浆)等样本中乙醛脱氢酶(ALDH)的活力。

检测原理：

酒精代谢的主要途径是乙醇脱氢酶(ADH)氧化成乙醛，然后是 NADH 依赖的乙醛脱氢酶(ALDH)氧化成乙酸。本试剂盒检测原理是底物在乙醛脱氢酶的作用下，将 NAD+转化为NADH，NADH在电子耦合剂的作用下使WST-8 显橙黄色，通过测定450 nm下吸光值变化可测得乙醛脱氢酶活性。

样本准备：

① 样本处理

血清(浆)样本：直接测定。组织样本：组织样本使用生理盐水(0.9% NaCl)匀浆处理。离心后取上清进行测定，部分上清样本用于蛋白浓度测定。

② 样本的稀释

在正式检测前，需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实验，根据预实验的结果，结合本试剂盒的线性范围：0.01–10.0 U/L。

操作步骤：

① 标准孔：取20μL 不同浓度的标准品溶液加入相应的酶标孔中。

测定孔：取20μL 待测样本加入测定孔中。

② 向步骤①中各孔依次加入160μL 反应工作液。

③ 向步骤②中各孔依次加入20μL 试剂四。

④ 振板3 s，室温避光静置5 min，酶标仪450 nm下检测各测定孔初始OD值 A1。

⑤ 37°C下避光孵育反应45 min。

⑥ 酶标仪于 450 nm 波长检测各测定孔OD值A2和各标准孔OD值，计算测定孔变化 OD 值△A (注：△A = A2- A1，标准孔只需要检测A2值)。

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