ElabscienceL-乳酸(LA)比色法测试盒(E-BC-K044-M)现货供应

ElabscienceL-乳酸(LA)比色法测试盒适用于检测血清（浆）、细胞上清、组织、细胞等样本中乳酸的含量。以氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）为氢受体，乳酸脱氢酶（LDH）催化乳酸脱氢产生丙酮酸，使 NAD+转化为还原型辅酶Ⅰ（NADH）。其中 N-甲基吩嗪甲基硫酸盐（PMS）递氢使氯化硝基四氮唑蓝（NBT）还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在 530 nm 时与乳酸含量呈线性关系。本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用 BCA 法

样本准备：

① 样本处理

血清血浆等液体样本：可直接测定。

组织样本：常规匀浆处理(生理盐水(0.9% NaCl 溶液)或 PBS(0.01 M，pH 7.4)。匀浆后，4℃，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。留取部分上清用于蛋白浓度测定。

细胞样本：取106细胞加入300μL生理盐水(0.9% NaCl溶液)或PBS(0.01 M，pH 7.4)进行匀浆。匀浆后，4℃，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。留取部分上清用于蛋白浓度测定。

② 样本的稀释

在正式检测前，需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实验，根据预实验的结果，结合本试剂盒的线性范围：0.12-7.0 mmol/L。

操作步骤：

① 标准孔：取5μL不同浓度标准品，加入到对应的标准孔中；

样本孔：取5μL待测样本，加入到样本孔中。

② 向①中各孔加入100μL酶工作液。

③ 向②中各孔加入20μL试剂三。

④ 37℃条件下孵育10 min。

⑤ 向标准、测定各孔中加入180μL 试剂四。

⑥ 酶标仪上振荡 5 s，酶标仪530 nm处，测定各孔OD值。

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