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022-66387942Elabscience甲酸盐比色法测试盒适用于检测动物组织样本及血清(浆)等液体样本中甲酸盐的含量。
甲酸脱氢酶(FDH)能够催化甲酸和 NAD+反应产生 NADH,NADH在PMS作用下,将电子传递给 WST-8,生产黄色的产物,其在450 nm处有特征吸收峰。样本中自身存在的NAD(P)H会产生一定的背景干扰,因此在测定过程中需要设定对照孔排除这种干扰。
试剂准备
① 检测前,试剂盒中的试剂平衡至室温。
② 试剂二工作液的配制:
取一支试剂二粉剂用0.17 mL试剂一充分溶解,临用前配制,于冰盒上取用,-20℃避光可保存7天。
③ 试剂三工作液的配制:
取一支试剂三粉剂用0.3 mL的试剂一充分溶解,临用前配制,于冰盒上取用,-20℃避光可保存7天。
④ 测定工作液的配制:
按照试剂一:试剂二工作液:试剂三工作液:试剂四 = 8:1:1:10的体积比混匀,按需要现配现用,避光保存。
实验关键点
① 试剂一取用时应倒出部分,再取用,避免试剂污染。
② 样本加入板孔中时应触底加入。
操作步骤
① 测定孔:向酶标板对应的测定孔中加入50μL的待测样本;
标准孔:向酶标板对应的标准孔中加入50μL不同浓度的标准品溶液;
② 向步骤①中各孔分别加入50μL的测定工作液;
③ 酶标仪上振板5 s,然后放入37℃恒温箱中,孵育30 min,于波长450 nm 处测定各孔OD值。
(注:随着孵育时间延长,显色会加深,在保证样本正常显色的情况下,尽量使标准曲线最高点的OD值处于1.5-2.0的范围内)
产品选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
E-BC-K1100-M | 甲酸盐比色法测试盒 | 96T(40 samples) |