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022-66387942全式金BL21(DE3)化学感受态细胞(CD601-03)是一种适用于高效外源基因蛋白表达的宿主菌株。它使用T7 RNA聚合酶作为表达系统,该酶的表达受λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子控制。这个启动子整合到BL21的染色体上。全式金BL21(DE3)化学感受态细胞特别适用于非毒性蛋白的表达需求。它被广泛应用于蛋白表达领域,可实现快速、高效地产生大量外源蛋白。
Tans BL21(DE3)化学感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达107cfu/μg DNA。使用Control PlasmidI(Amp+)用于检测细胞是否具有表达功能,表达蛋白大小为25 kDa. 该菌株可在-70℃保存六个月,但不适合在液氮中保存。
产品特点:
全式金BL21(DE3)化学感受态细胞(CD601-03)是一种理想的宿主菌株,用于高效表达外源基因的蛋白。它采用T7 RNA聚合酶作为表达系统,并由λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子控制T7 RNA聚合酶基因的表达。这个启动子整合在BL21染色体上。该菌株非常适合表达非毒性蛋白。它被广泛应用于T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达领域。
操作方法:
· 取50 ml冰浴上融化的感受态细胞,加入目的DNA,轻轻混匀,在冰浴中放置30分钟。
· 42℃水浴热激45秒,然后快速将管转移到冰浴中2分钟,该过程不要摇动离心管。
· 向每个离心管中加入500 μ无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃,200rpm培养1小时使细菌复苏。
· 根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的LB琼脂培养基上,将细胞均匀涂开。将平板置于37℃至液体被吸收,倒置平板,37℃过夜培养。
注意事项:
· 避免反复冻融:尽量避免频繁地冻融细胞。每次解冻后,尽可能立即进行转化实验,而不是将其再次冷冻。
· 避免使用移液枪吹吸:在操作过程中,尽量避免使用移液枪进行强力吸取和排放细胞。这样可以减少对细胞的机械压力和损伤。
· 轻柔操作:在整个操作过程中要注意轻柔处理细胞。避免过度摇动或震荡细胞,以防止细胞破裂或损坏。
产品选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
CD601-03 | BL21(DE3) Chemically Competent Cell | 20×100 μl |