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022-66387942全式金Trans5α化学感受态细胞(CD201-02)是经过特殊工艺制作的细胞,适用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒DNA进行测试时,转化效率可高达每微克DNA超过108个转化单位(cfu)。该菌株的基因型为F-φ80d lacZ△M15△(lacZYA-argF)U169 end Al recA1 hsdR17(rk-,mk+)supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA。
全式金Trans5α化学感受态细胞(CD201-02)也适用于蓝白斑筛选,其突变基因recA₁和endA₁有助于克隆DNA的稳定性和高纯度质粒DNA的提取。这种细胞可以在-70℃保存六个月,但不适合在液氮中保存。请注意遵循适当的存储条件以确保细胞的长期保存和使用质量。
操作方法:
·取50 ml冰浴上融化的感受态细胞,加入目的DNA,轻轻混匀,在冰浴中放置30分钟。
·42℃水浴热激45秒,然后快速将管转移到冰浴中2分钟,该过程不要摇动离心管。
·向每个离心管中加入500μ无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃,200rpm培养1小时使细菌复苏。
·根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的LB琼脂培养基上,将细胞均匀涂开。将平板置于37℃至液体被吸收,倒置平板,37℃过夜培养。
注意事项:
· 避免反复冻融:尽量避免频繁地冻融细胞。每次解冻后,尽可能立即进行转化实验,而不是将其再次冷冻。
· 避免使用移液枪吹吸:在操作过程中,尽量避免使用移液枪进行强力吸取和排放细胞。这样可以减少对细胞的机械压力和损伤。
· 轻柔操作:在整个操作过程中要注意轻柔处理细胞。避免过度摇动或震荡细胞,以防止细胞破裂或损坏。
产品选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
CD201-02 | Trans5α Chemically Competent Cell | 20×100 μl |