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索莱宝Solarbio小鼠骨髓淋巴细胞分离液试剂盒(P6040)现货供应

 更新时间:2024-04-11    点击量:391

产品名称:索莱宝Solarbio小鼠骨髓淋巴细胞分离液试剂盒(P6040)现货供应

产品货号:P6040

产品品牌:索莱宝

产品简介:

规格

200mL/KIT

有效期

2

储存条件

RT,避光

单位

产品组成:

各种动物脾脏淋巴细胞分离液

200mL

全血及组织稀释液

200mL

细胞洗涤液

200mL

实验流程:

淋巴细胞分离方法(仅供参考)

1. 制备脾脏的单细胞悬液。

2. 取一支适当的离心管,加入与脾脏单细胞悬液等量的分离液(分离液最少不得少于3 mL,总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果)。

3. 小心吸取单细胞悬液加于分离液液面上,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取单细胞悬液,然后小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。)

4. 室温,水平转子500~900g,离心20~30min。(根据脾脏单细胞悬液的量确定离心条件,单细胞悬液量越大,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件可以自行摸索,以达到最佳分离效果)。

5. 离心后,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为稀释液层;第二层为环状乳白色淋巴细胞层;第三层为透明分离液层;第四层为红细胞层。

6. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞至另一洁净的 15mL离心管中,向离心管中加入10ml细胞洗涤液洗涤白膜层细胞,250g,离心10min

7. 弃上清,5mLPBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心 10min

8. 重复步骤7

9. 弃上清,细胞重悬备用。

骨髓单细胞悬液的制备方法(仅供参考)

小动物骨髓的采集:

1. 处死动物,无菌提取股骨和胫骨,剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔(注意尽可能少的剪走骨髓腔)。

2. 1ml的无菌注射器,吸取少量的含有10%标准胎牛血清的稀释液或者是含有血清的培养基,冲洗骨髓腔以获得骨髓。

3. 最终制备成2×1081×109 /ml 的单细胞悬液备用。大动物骨髓的采集:大动物骨髓的采集可采取活体穿刺方法:先将动物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到骨髓的距离,把骨髓穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针钻入,当穿刺针进入骨髓腔时常有落空感。连接注射器缓慢抽吸骨髓组织,当注射器内抽到少许骨髓时即停止抽吸。用含10%标准胎牛血清的稀释液调整细胞浓度为2×108-1×109 /mL的单细胞悬液备用。

相关文献:

[1] Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 1968; 97: 7.

[2] Ting A, Morris PJ. A technique for lymphocyte preparation from stored heparinized blood. Vox Sang. 1971 Jun; 20(6): 561-3.

[3] Boyum A. Separation of Blood Leucocytes, Granulocytes and Lymphocytes Tissue Antigens. 1974; 4(4): 269-74.

[4] Weisbart RH, Webb WF, Bluestone R, Goldberg LS. A simplified method for lymphocyte separation. Vox Sang. 1972; 23(5): 478-80.

欢迎订购:

货号

产品名称

规格

P6040

Mouse bone marrow lymphocyte isolation liquid kit

200mL/KIT


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