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022-66387942产品名称:Elabscience小鼠胰岛素ELISA试剂盒(E-EL-M1382)现货供应
产品货号:E-EL-M1382
产品品牌:Elabscience
产品用途:该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清和血浆中INS浓度。
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。用抗小鼠 INS 抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的小鼠 INS 会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗小鼠 INS 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗小鼠 INS 抗体与结合在包被抗体上的小鼠 INS 结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450 nm 波长处测 OD 值,INS 浓度与 OD450 值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中 INS 的浓度。
注意事项:
试剂盒注意事项:
1) 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。
2) 试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。
3) 刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按照上述表格中保存条件存放。
4) 请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液。未用完的浓缩生物素化抗体(100×)、浓缩HRP酶结合物(100×)、酶标板及其他原液按照上述表格中保存条件存放。
5) 检测使用的酶标仪需要安装能检测450±2 nm波长的滤光片,光密度范围在0-3.5之间。建议使用时提前15分钟预热。
6) 请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。
7) 试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,严禁混用。
8) 请勿使用过期的试剂。n
样品注意事项:
1) 收集血液的试管应为一次性无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品。
2) 样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。
3) 试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围。如果样品中待测物浓度过高或过低,请对样本做适当的稀释或浓缩。
4) 若所检样本不在说明书所列样本之中,建议做预实验验证其检测有效性。若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液,由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。
5) 某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。
操作步骤:
1. 分别设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔加入 100 μL倍比稀释的标准品,空白孔加入 100 μL 标准品&样本稀释液,其余孔加入 100 μL 待测样本(建议所有的待检样本和标准品在检测中设立复孔;建议通过预实验或咨询技术支持确定待检样本的稀释倍数)。给酶标板覆膜,37℃孵育 90 分钟。提示:加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,避免产生气泡。加样时间宜控制在 10 分钟内。
2. 甩尽孔内液体,不用洗涤。每个孔中加入生物素化抗体工作液 100 μL,酶标板加上覆膜,37℃温育 1 小时。
3. 甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干。每孔加洗涤液 350 μL,浸泡 1 分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,拍干。重复此洗板步骤 3 次。提示:此处与其他洗板步骤都可使用洗板机(参考北京拓普 DEM-3 型洗板机参数设置:2 点吸,每孔加入洗涤液 350 μL,振板 5 秒,吸液 0.5 秒)。洗板完成后请立即进行下步操作,不要让微孔板干燥。
4. 每孔加 HRP 酶结合物工作液 100 μL,酶标板加上覆膜,37℃温育 30 分钟。
5. 甩尽孔内液体,洗板 5 次,方法同步骤 3。
6. 每孔加底物溶液(TMB)90 μL,酶标板加上覆膜,37℃避光孵育 15 分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过 30 分钟。当标准孔出现明显梯度时(前 4 个显色孔出现明显蓝色梯度),即可终止。提前 15 分钟打开酶标仪预热。
7. 每孔加终止液 50 μL,终止反应。提示:终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。
8. 立即用酶标仪在 450 nm 波长测量各孔的光密度(OD值)。
欢迎订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
E-EL-M1382 | 小鼠胰岛素ELISA试剂盒试剂盒 | 96T |
48T | ||
96T×5 |
天津益元利康生物科技有限公司现货供应Elabscience小鼠胰岛素ELISA试剂盒(E-EL-M1382),欢迎选购!