简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（TD408）产品介绍

产品名称：琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

产品货号：TD408- 10 (10 次反应)

TD408-50 (50 次反应)

TD408-200 (200 次反应)

产品特点：

可在 25 µl 的洗脱液中回收到超纯的 DNA，并且对于一系列下游的分子生物实验非常理想. 

此过程与 TAE 或者 TBE 缓冲的凝胶是兼容的. 

切下范围在 50bp 到 23kb 之间的 DNA 回收率为 50%-90%. 并且不会发生像常在玻璃奶和基于阳粒子树脂过程中的 DNA 切变现象. 

本产品仅供科研使用

试剂制备：

DNA在使用之前一定要配好，添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记！！！

10次反应的DNA洗涤液应按照标签上的提示添加100%的乙醇；

50次反应的DNA应添加24ml 100%的乙醇(26 ml 95%的乙醇)到6ml的DNA中；

100次反应的DNA应添加48ml 100%的乙醇(52 ml 95%的乙醇)到12ml的DNA中；

200次反应的DNA应添加96ml 100%的乙醇(104 ml 95%的乙醇)到24ml的DNA中。

产品特性：

DNA纯度-洗脱到的高质量、纯化的 DNA 尤其适用于 DNA 测序, DNA 连接, 内切酶消化,基因芯片；

DNA大小-50 bp 到 23 kb 之间；

DNA回收率-一般的，可在 10 µl 的水中洗脱出 5 µg 的 DNA 。对于从 50bp 到10kb 的DNA，回收率为 70%-90% ，对于从 11kb 到 23kb 的 DNA ，回收率为 50-70%；

样品来源-来自 PCR， 限制性内切酶消化， 质粒抽提， 激酶反应，等的DNA和在TAE 或TBE缓冲的琼脂糖凝胶切片中的 DNA。

产品特点：

1. 使用了优质溶胶液，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

2. 改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH 缓冲在最佳结合范围内。

3. 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

4. 此试剂盒中吸附膜吸附DNA的效率很高。但如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多，造成溶胶后溶胶液pH偏高，会导致回收率降低。

操作方案：

以下离心操作步骤的离心力均在 10,000 - 16,000 x g 之间进行。

1. 使用刀片或手术刀把 DNA 片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内.

Note: 从凝胶上切下的琼脂糖尽可能的要少.

2. 将 3 倍体积的 溶胶液 添加到每 1 体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中.

Example:对 于 200 µl (mg) 的 琼 脂 糖 凝 胶 切 块 ， 添 加 600 µl 的 ADB 缓冲液.

3. 在 37-55C 下温水浴 10~20 分钟直到凝胶切块溶解.

Note: 确定凝胶切块溶解是很重要的步骤. 在温水浴过程中可辅以温和的搅拌有助于凝胶的溶解。 如果 DNA 大小超过 8kb ，加热之后需要额外添加等量胶块体积的水。例如： 200 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块，添加 600 µl 的 ADB 缓冲液.加热之后添加 200µl 的水。

4. 将溶解的琼脂糖切块溶液放到 2 号柱 中并把柱套在 收集管 里.

5. 离心 1 分钟. 去除滤出液. Note: 柱所能容纳的样品体积为 800 µl. 所以, 如果样品体积超过 800 µl 时，柱就要被多次填充和离心。

6. 添加 200 µl 的 DNA 洗涤液 到柱中离心 1 分钟，去除滤出液.

7. 重复第 6 步洗涤步骤.

8. 可选步骤：将收集管中的废液倒掉，并将 2 号柱套回收集管中额外离心2 分钟，尽量除去洗涤液，以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。

9. 直接添加 25 µl DNA 洗脱液到柱基质中. 将柱套在 1.5 ml 离心管中离心 1 分钟来洗脱

DNA.Note :从柱中洗脱出的 DNA 产量与 pH 和温度有关. 如果使用水来洗脱， 确保 pH 是>6.0. 在向柱中加入水后静置 1 分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA 的产量.在 60-70 oC 的水中洗脱 DNA 可增加较大DNA(> 10 kb)的产量

Note: 如果试验需要的话 TE 缓冲液 (10 mM Tris-HCl， 1 mM EDTA， pH 8.0) 或改进的TE (10 mMTris-HCl， 0.1 mM EDTA， pH 8.5) 也可用来洗脱.

在水中得到的超纯 DNA 可进行后续试验.

欢迎订购：

天津益元利康生物科技有限公司现货供应简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（TD408），欢迎选购！