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022-66387942产品名称:血浆cfDNA提取试剂盒(离心柱)
产品货号:TD476-50 (50 次反应)
产品亮点:
可从 10ml 以内的血清/血浆,1m 以内的羊水或脑脊液中提取到高纯度的游离 DNA。
获得的 DNA产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。
注意事项:
环境温度低时 SP消化液或者 SPDNA洗涤液1可能出现析出和沉淀,可以在 37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
蛋白酶K及其保存液可常温运输。
产品特性:
样品种类: 血清,血浆,羊水和脑脊液(CSF)
处理的体积量: 血浆- 单次离心:最多 3ml 两次离心:最多 10ml
血清- 最多 10ml
羊水- 最多 1ml
脑脊液- 最多 1ml
DNA 纯度: 获得的 DNA 产量高、纯度好, 可以直接用于 qPCR 高通量测序等各种分子生物学实验。
DNA 回收情况: 回收的 DNA≥100bp(本试剂盒针对无细胞的 DNA 提取经过优化),总量根据不同的样品个体差异可能会比较大。一般从血清或血浆中提取到的 DNA 浓度在 1-100 ng/ml。
需要的仪器设备:水浴锅或者金属浴(55℃)。微型离心机,负压多联器或立式离心机
试剂制备:
1.使用前需要添加6.5ml蛋白酶K保存液到蛋白酶K(125mg)里。蛋白酶K的终浓度约为20mg/ml。混匀之后放在-20℃保存
2.使用前需要添加48 ml 95-100%的无水乙醇到12ml的SP DNA洗涤液2中。(B)蛋白消化
操作步骤:
从≤5ml的样品中提取游离 DNA
除非特殊说明,一般常温(15-30℃)进行以下操作步骤,以下步骤以 200u血浆,血清或其他生物液体样品为例,当样品量发生变化的时候,只需要等比例的调整 SP 消化液,蛋白酶K和 SP DNA 结合液的用量就可以。
1.添加 50u 的 SP 消化液到每 200u 的样品中,混匀。(根据表格1按照一定比例添加试剂)2.添加 20u 的蛋白酶 K到每 200m 的样品中,混匀。(根据表格1按照一定比例添加试剂)3.在 55℃下孵育 30 分钟。
4.添加 2 倍体积的 SP DNA 结合液到步骤 3中消化的样品中,混匀。
以下步骤可以通过真空负压的方式也可以通过离心的方式进行操作(负压设备所用真空多连器推荐美国 ZYMORESEARCH 公司)
负压操作步骤:
5.确认3号柱S套装(连接15ml套筒)连接紧密后放置在负压多连器上。
6.倒入上述步骤4的混合液(含 SP DNA 结合液),打开真空开关使液体通过柱子。确保液体通过柱子并且没有残留液体下流后,关闭真空泵并拔掉连接的 15ml套筒。
以下步骤 7-8 也可以用台式离心机操作。
7.关掉真空开关,倒入 400uSP DNA洗涤液1到柱子上,打开真空开关,让液体通过3号柱S
8.关掉真空开关,加入 700μSP DNA 洗涤液 2(请先检査是否已加入无水乙醇!)到3号柱S内,打开真空开关让液体通过柱子。
9.重复第 8步。
10.将3号柱S套在 2ml收集管上,然后放置在台式离心机上全速离心2分钟以去除残留乙醇。
11.将3号柱S套在一个干净的 1.5m离心管内,添加 50u的 DNA洗脱液到柱基质上。(洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热,洗脱效果更好),室温放置3分钟,在>10,000xg条件下离心1分钟来洗脱 DNA。欢迎订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
TD476- 50 | 血浆cfDNA提取试剂盒(离心柱) | 50次 |
天津益元利康生物科技有限公司现货供应简石生物血浆cfDNA提取试剂盒(离心柱)(TD476),欢迎选购!