细胞冻存的注意事项

　　细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。既可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，又起到了细胞保种的作用。那么你知道细胞冻存的注意事项有什么吗？让我们一起来看看吧！
 

　　1. DMS0稀释时会产生巨大的热量，不能直接添加到细胞液中，需预先配制，且DMSO必须是细胞培养级别的；
 

　　2. 缓慢冷冻，使细胞逐渐脱水，以免因形成巨大的冰晶而受损；
 

　　3. 选择生长良好、密度约为80-90%、活力超过90%的细胞进行冻存；
 

　　4. 当细胞密度低于5x105个活细胞/mL时，复苏成功的几率较低；
 

　　5. 不宜长时间将细胞保存在-80°C的冰箱中。我们建议将其放入液氮中保存，并确保在-80°C的冰箱中保存的时间不超过48小时；
 

　　6. 在冻存细胞操作时，请佩戴防护眼镜和手套，以免受到液氮的冻伤；
 

　　7. 务必拧紧冻存管的盖子，以免在复苏过程中渗水，导致支原体污染；
 

　　8. 定期检查液氮储备，确保所有细胞浸没在液体之下；
 

　　9. 在每个冻存管上标明细胞的名称和冻存时间，并记录在册，以避免取错细胞或找不到冻存管的情况发生；
 

　　10. 在-20°C的冰箱中将细胞放置的时间不应超过1小时，以防止冰晶过大而损坏细胞。
 

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