细胞转染的分类

　　细胞转染是指将外源性基因导入到细胞内的技术。那你知道细胞转染是如何分类的吗？让我们一起来看看吧！
 

　　一、根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短，可分为瞬时转染和稳定转染。
 

　　瞬时转染(transient transfection)：指将精心构建的质粒通过一定方式导入哺乳动物细胞内，其中所携带的外源基因不与细胞内基因组整合。
 

　　细胞中外源基因的瞬时转染表达时间有限，通常仅持续数日，直至外源基因由于细胞分裂过程中的各种因素而丧失。此方法常用于启动子和其他调控元件的研究。
 

　　目前，凭借多种转染试剂的创新，已能在哺乳动物细胞中实现瞬时转染，以生产具有适当折叠和翻译后修饰的重组蛋白。
 

　　稳定转染(Stable transfected)：外源DNA被整合到细胞基因组中或作为附加质粒保留在细胞内。与瞬时转染不同，稳定转染能够与宿主基因组整合，因此转染细胞及其后代细胞的基因组中同时保留了转染的DNA。
 

　　由于稳定转染效率较低，因此选择有效的转染策略和筛选方法至关重要。
 

　　二、根据转染方式可分为化学、生物和物理方法。
 

　　细胞由带有负电荷的磷脂双分子层构成，对于大分子物质而言，其形成了不可透过的屏障，例如DNA和RNA的磷酸骨架，它们也带有负电荷。为了让核酸穿过细胞膜，研究人员开发了多种技术，大致分为三类：
 

　　化学方法：利用载体分子包裹核酸，使其呈现中性电荷或正电荷。例如阳离子脂质体方法、磷酸钙共沉淀法、其他阳离子物质介导等技术。
 

　　生物方法：利用基因工程病毒将非病毒基因转染至细胞中。目前较常见的是各种病毒介导的转染技术。
 

　　物理方法：通过在细胞膜表面产生瞬时的孔道，导入DNA。例如电穿孔法、显微注射法。
 

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