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细菌活化的方法

 更新时间:2024-06-13    点击量:710
  菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。下面让我们一起来看看细菌活化的方法吧!
 
  一、一般菌种临时存放及活化
 
  1.低温保存管应存放于-20℃ ~ -80℃之低温条件下。
 
  2.准备 37℃之 70﹪酒精浴槽(只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,以免危险;若以 37℃水浴取代,应避免水中微生物污染),其中事先安放小试管架,液面不可高达管塞。
 
  3.将低温保存管从低温保存条件中取出,置于 37℃浴槽之小试管架上。
 
  4.不断轻微摇动低温保存管,液面不可高至管塞,直至结冰溶解(约需 2 分钟)。
 
  二、无菌培养
 
  1.用无菌微量吸管,从已溶解之低温保存管 吸取 1-2滴之菌液,滴入固态培养基某一边缘附近,以划线法接种于培养基。
 
  2.将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
 
  三、平板划线分离法
 
  平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的,故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
 
  1.手持金属接种环,用酒精灯将接种环(共约5cm)烧至火红,并不断来回烧烤金属固定杆之前约10公分,等待约10秒钟,将接种环前端轻触培养基边缘凝胶(无菌体部份),待接种环冷却后,以环沾黏菌滴,由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线,直到涵盖1/3培养基为止。
 
  2.灼烧接种环,待数秒冷却后,旋转培养基自I区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域。
 
  3.重复2的动作完成。
 
  4.灼烧接种环,将接种环归位。
 
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