ELISA实验操作方法

　　ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，酶联免疫吸附试验)是一种常用的实验技术，用于检测和定量分析样品中特定抗原或抗体的存在。ELISA是基于免疫学原理的一种高灵敏度和高特异性的实验方法。下面让我们一起来看看ELISA实验操作方法吧！
 

　　ELISA实验通常包括以下步骤：
 

　　1. 涂覆：将待检测的抗原或抗体溶液加入到微孔板(通常是96孔板)中，并在孔板表面上形成一层固定的抗原或抗体。这个过程被称为涂覆。
 

　　2. 阻断：为了防止非特异性结合，需要在涂覆后加入一种阻断剂，例如牛血清蛋白(BSA)或牛奶粉，以覆盖孔板上未被固定的表面。阻断剂可以减少非特异性结合和降低背景信号。
 

　　3. 样品加入：将待测样品加入到微孔板中，样品中的目标抗原或抗体与固定在孔板上的抗体或抗原相互作用。
 

　　4. 洗涤：通过反复洗涤孔板，去除未结合的物质，以减少背景信号。
 

　　5. 探针加入：加入与待测物体特异性结合的酶标记二抗(例如辣根过氧化物酶-HRP)或酶标记抗原，使其与样品中的目标物体结合。
 

　　6. 洗涤：再次洗涤孔板，去除未结合的酶标记物。
 

　　7. 底物加入：加入一种底物，其与酶标记物相互作用，产生可测量的信号。常用的底物是一种可被酶催化产生颜色或荧光的物质。
 

　　8. 反应停止：通过加入一种停止剂，停止底物的反应，阻止信号进一步增加。
 

　　9. 信号测量：使用光谱仪或荧光测量仪测量底物反应产生的信号，根据信号的强度来确定样品中目标物体的浓度。
 

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