实验室常用的几种细胞核染料

一、细胞核结构：

细胞核的结构有核膜、核仁、染色质、核基质。主要功能是遗传物质DNA储存和复制的主要场所，是细胞遗传和代谢的控制中心。

①核膜：核膜是细胞核的外部边界，由内外两层单位膜组成，将细胞核与细胞质分隔开来。

②核孔复合体：核孔复合体是核膜上的特殊结构，由多种蛋白质组成，形成环状开口，允许大分子物质如mRNA、tRNA以及某些蛋白质在核质之间穿梭。

③染色质：染色质是细胞核内的重要组成部分，由DNA和蛋白质组成，是遗传信息的载体。

④核仁：核仁是细胞核内的一个致密结构区域，与核糖体的形成密切相关。

⑤、核基质或核骨架：核基质或核骨架是细胞核内除染色质和核仁以外的所有成分，包括核液和核骨架两部分。

二、对死细胞进行染色的核染料

(1) PI染料

PI，全称为碘化丙啶（Propidium Iodide），是一种广泛应用于细胞生物学和病理学研究中的细胞核染色试剂。

PI染色原理：

在正常情况下，活细胞的细胞膜是完整的，具有选择透过性，能够阻止PI等大分子物质进入细胞内部。

然而，在细胞凋亡中晚期或坏死过程中，细胞膜的完整性受到破坏，通透性增加，使得PI能够穿透细胞膜进入细胞内部。

进入细胞内部的PI能够特异性地与双链DNA结合，形成PI-DNA复合物，荧光强度增加20-30倍。

这种复合物在特定波长的激发光照射下会发出红色荧光，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪观察到细胞核的染色情况。

(2) EthD-I法

Ethidium Homodimer-I（EthD-I）又叫做同二聚乙锭-I，是一种非细胞通透性活率指示剂，它自身荧光很弱，但一旦与DNA结合后，荧光会明显增强（通常增强30多倍），发出红色荧光（最大激发/发射波长分别为大约528/617nm）。由于EthD-I带有较强的正电荷，它不能穿过完整的活细胞膜，因此通常用于检测死细胞或细胞膜受损的细胞。当细胞膜完整性受损时，EthD-I能够进入细胞内部并与DNA结合，从而发出明亮的红色荧光，指示细胞的死亡状态。

(3) DAPI

DAPI中文4',6-二脒基-2-苯基吲哚，是一种能够对DNA进行染色的细胞核染料，与DNA中的A-T碱基对进行特异性结合，形成稳定的复合物。这种结合不会改变DNA的二级结构，但会使DAPI的荧光强度显著增强。

三、对活细胞进行染色的核染料

(1) Hochest

Hoechst染料是一类能够穿透细胞膜并与DNA结合的非嵌入性荧光染料,通过与DNA中的碱基进行氢键结合，形成染料-DNA复合物。该复合物在紫外光激发下会发射出蓝色荧光。由于DNA分子在细胞核中富集，因此Hochest染色可用于标记细胞核。

(2) Draq 5

Draq 5是一种具有高亲和力的远红外荧光活细胞DNA染料，是一种对双链 DNA 具有高亲和力的蒽醌染料。它可以透过细胞膜的染料，可标记活细胞或固定后/死细胞。

 四、核酸染料推荐

Biotium核酸染料代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供Biotium产品，如核酸染料、qPCR染料、细胞染色剂等，更多Biotium品牌产品等，欢迎咨询！