PCR DNA聚合酶都有什么？

DNA聚合酶是催化DNA或RNA为模板合成DNA的一类酶的总称，又称DNA依赖的DNA聚合酶（DNA—dependent DNA polymerase，DNA pol），它是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。此酶是美国科学家Arthur Komberg于1957年在大肠杆菌中发现的，被称为DNA聚合酶Ⅰ（DNA polymerase Ⅰ，简称polⅠ）以后陆续在其他原核生物及真核生物中找到了多种DNA聚合酶。这些聚合酶的共同特点是：它们都能把脱氧核糖核苷酸（dNTP）连续的加到双链DNA引物链的3'-羟基末端上，催化核苷酸的聚合，形成新的DNA链。

PCR DNA聚合酶的种类包括Taq DNA聚合酶、高保真DNA聚合酶、热启动DNA聚合酶、等温扩增DNA聚合酶和链置换DNA聚合酶等。

一、PCR DNA聚合酶：

1. Taq DNA聚合酶

特点：Taq DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取的，具有很高的热稳定性，能够在70℃保持活性，适合标准的PCR反应。它缺乏3’→5’核酸外切酶活性，因此无校正功能，容易产生错配碱基。

应用：用于常规PCR扩增，尤其是当对保真度要求不高时。其扩增产物3’末端带有A尾，可直接用于TA克隆。

2. 高保真DNA聚合酶

特点：这类酶具有3’→5’核酸外切酶活性，能够校正错误插入的核苷酸，显著降低错配率。常见的有Pfu、KOD、Phusion等。

应用：适用于需要高保真度的应用场景，如基因克隆、定点突变、测序及SNP分析等。例如，Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase具有很高的保真性和扩增效率，适用于复杂模板的高保真扩增。

3. 热启动DNA聚合酶

特点：通过化学修饰或抗体结合，在室温下抑制其活性，直到高温激活。这种酶可减少非特异性扩增，提高PCR反应的特异性和灵敏度。

应用：适用于需要高特异性扩增的实验，如多重PCR、复杂模板的扩增等。例如，Hieff Union Hotstart High Specific Taq DNA Polymerase能够有效防止非特异性扩增，并提高扩增特异性。

4. 等温扩增DNA聚合酶

特点：这类酶具有链置换活性和5’→3’聚合酶活性，能在恒温条件下进行快速、高效、特异性扩增。

应用：适用于等温扩增技术，如LAMP、CPA、RCA等。例如，Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase具有更高的灵敏度、扩增效率和稳定性，且增加了dUTP耐受性，非常适合基于等温扩增技术的应用。

5. 逆转录DNA聚合酶

特点：这类酶以RNA为模板，按5’→3’方向合成互补DNA（cDNA），常用于研究基因表达。

应用：用于将RNA转录为DNA，如RT-PCR、qRT-PCR等。常用的逆转录酶包括M-MLV和AMV。

6. 链置换DNA聚合酶

特点：具有强链置换活性，可以在DNA复制过程中取代旧链，常用于等温扩增技术。

应用：适用于基于链置换的等温扩增反应，如LAMP和滚环扩增（RCA）。例如，Bca best聚合酶和phi29 DNA聚合酶在扩增速度、产量和热稳定性方面都有优异的表现。

二、凡知医学DNA聚合酶推荐：

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