PCR的提出和发展

一、起源

PCR的发明人，一般认为是穆里斯(K. Mullis)，他也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。穆里斯在好些写作中，包括1990年在《科学美国人》上的一篇文章，及1998年的自传《心灵luo舞》(Dancing Naked in the Mind Field)，都曾提到PCR这个构想的起源。然而，PCR从构想到实现，真的就是穆里斯一人之功吗?PCR究竟是在什么样的环境下诞生的呢?

穆里斯的出身是生物化学家，1972在加州大学伯克利分校取得博士学位，专长有机合成。一早他就表现出桀骜不驯的性格，在那嬉皮的年代，吸食自制的迷huan药不算太稀奇，穆里斯也乐于此道。更让人难以想象的是，他在经历迷huan药之旅的过程中，居然想出了某个解释大爆炸宇宙学的理论，写了出来投稿到《自然》周刊，居然登了出来。他也因此通过了博士资格考试，因为有文章发表在《自然》周刊的教授已然不多，学生更是少见。至于他的博士论文，也是用"带点幽默的口语化写成"(穆里斯自己的说法)，要不是宽容的指导老师帮他讲话，只怕要重写。

1983年春天的一个周五晚上，穆利斯开车带着女友前往乡间度周末。在蜿蜒的乡间公路上开着车，一段DNA反复复制的景像，在他的脑海里冒了出来。

事实上，DNA复制起始于DNA的解链，只需要通过加热让双链DNA变为单链DNA，然后再添加和单链DNA末端相结合的引物DNA，这样就开始了复制的过程，因此，只需要人为的给予其一些条件，就可以让DNA在实验室环境下由1个变为2个、2个变为4个……从而大量地复制扩增!这些关于PCR雏形的想法让穆利斯兴奋不已，整个周末，山间小屋的全部纸片都被他用来打草稿了。

1983年8月，穆利斯第一次正式地将他所设想的PCR方法原理在公司里作了展示，但是穆利斯的设想并没有得到大家的认同。经过几个技术员和穆利斯反反复复地调整实验条件，直到1984年11月，他们第一次获得了可信的结果，接下来，日裔技术员才木的加入使得PCR的结果更加干净漂亮，毋庸置疑!1986年5月举行的“人类分子生物学"专题研讨会，在这次大会中，穆利斯在很多分子生物学界quan威面前第一次报道了PCR的原理和实际应用结果，向世人建立了其PCR发明人的印象。

二、发展阶段

1988年，塞凯等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌中提取到了一种耐热DNA聚合酶，将该来源的聚合酶用在PCR之后的结果让大家欣喜若狂，此酶不仅耐高温，热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶，并且大大地提高了扩增片段的特异性和效率，灵敏度也大大提高。此酶被命名为TaqDNA多聚酶。这也就是现在PCR技术所常使用的酶。

三、现阶段

到如今2013年，PCR已发展到第三代技术。1976年，中国科学家钱嘉韵，发现了稳定的Taq DNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。直到后来自动热循环仪的发明，实现了PCR的快速扩增、自动化，才使得PCR广泛地应用起来 。

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