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022-66387942上次我们分享了IHC未染色或无信号的原因分析,这次让我们来看看IHC染色不均匀是为什么吧。
一、组织切片制备
解释:组织切片薄厚不均匀
→建议:更换刀片
二、组织固定
1.解释:酒精固定不足会产生伪影;
→建议:延长固定时间;尝试不同的固定液
2.解释:固定延迟导致抗原扩散;
建议:立即固定组织;可以考虑使用交联固定剂
三、脱蜡
解释:脱蜡不wan全
→建议:使用新鲜的二甲苯
四、抗体兼容性
解释:一抗可能结合其他抗原上的表位
→建议:从多抗切换至单抗;尝试不同的单抗
五、透化
解释:细胞膜被破坏,膜蛋白丢失
→建议:使用低浓度或更温和(Tween-20)的透化试剂
六、组织切片状态
解释:组织切片未保持湿润
→建议:在染色阶段避免组织切片干燥
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