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022-66387942前言:
细胞在康宁Matrigel基质这种原始且可靠的细胞外基质(ECM)上表现出良好的性能。
近30年前,研究人员一直在寻找促进小鼠肉瘤细胞生长的方法。最终的解决方案就是:康宁Matrigel基质,其为分离自Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物,该肿瘤富含ECM蛋白,如层粘连蛋白(主要成分)、IV型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多种生长因子。
如今,这种基于ECM的天然水凝胶是使用zui广泛的体外2D和3D细胞培养模型,可使您:
1、改善正常和转化的贴壁依赖性上皮细胞以及其他类型细胞的粘附和分化。
2、更好地模拟体内环境,适用于2D和3D细胞培养应用。
应用
康宁Matrigel基质可有效促进正常和转化的贴壁依赖性上皮细胞以及其他类型细胞的粘附和分化,包括神经元、支持细胞、鸡晶状体、血管内皮细胞以及肝细胞。
康宁corning代理——天津益元利康生物科技有限公司
一、康宁基质胶介绍:
康宁Matrigel基质是分离自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物,该肿瘤富含细胞外基质蛋白,包括层粘连蛋白 (主要成分)、IV型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多种生长因子。
1.质量
通过小鼠抗体产物 (MAP) 检测进行常规小鼠菌落病原体筛选
对包括LDEV在内的多种病原体进行广泛的PCR检测,确保对生产过程中使用的原材料实施严格控制
细菌、真菌和支原体检测均为阴性
通过Lowry方法测定蛋白浓度
通过鲎阿米巴样细胞溶解物试验测定内毒素水平
在37℃下进行14天康宁Matrigel基质凝胶稳定性测试
利用神经轴突生长试验测定各批次的生物活性。将鸡背根神经节接种到1.0mm厚的康宁Matrigel基质上,48小时后,在未添加神经生长因子的情况下,神经轴突生长试验需呈阳性反应
2.来源
Engelbreth-Holm-Swarm小鼠肿瘤
制备和储存 置于-20℃下保存。避免反复冻融。切勿储存于无霜冰箱内。冷冻保存。
二、康宁Matrigel基质胶应用领域
● 影响成年大鼠肝细胞基因表达
● 小鼠和人乳腺上皮细胞3D培养
● 体内外周神经再生
● 代谢和毒理学研究
● 肿瘤细胞侵袭试验
● 体外和体内血管生成研究
● 人类肿瘤在免疫抑制小鼠体内扩增
● 人胚胎干细胞和诱导多能性干细胞 (hiPSc) 维持
● hiPS细胞的神经元分化
三、康宁基质胶型号列表及如何选择
四、常见问题解答
⚑ Matrigel到货需要注意什么?
首先确认是否由干冰运输,到货时包装箱中干冰是否足量,查看Matrigel液面是否基本水平,以及瓶身侧壁、瓶口有无Matrigel融化的痕迹,以确保运输质量;若发现问题,请及时拍照记录,并联系经销商反馈。
⚑ 如何储存Matrigel?
收到产品并确认到货情况无异常后,请将Matrigel储存于-20℃冰箱,长期保存可置于-80℃冰箱。切勿将Matrigel储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存,应避免Matrigel反复冻融。
⚑ Matrigel颜色为什么会有不一样?
无酚红Matrigel没有颜色,融化后应是透明的;
含酚红Matrigel颜色可以在明黄色至暗红色之间变化,这些颜色变化是正常现象。因为酚红存在时,在温度、pH不同的情况下液体会出现颜色的差异。
⚑ 如何分装Matrigel?
建议根据您一次的使用量做小量分装,。请注意与Matrigel接触的所有耗材如枪头、管子均需事先预冷,且在冰上无菌操作。分装后的Matrigel可保存在-20℃或-80℃冰箱。建议保留瓶子的标签或记录下货号(Catalog Number)及批次号(LOT number),以便后续查询追踪相关信息。
⚑ Matrigel融化时发现有凝胶,融化不了是怎么回事?
Matrigel对温度非常敏感,超过10℃即开始成胶,超过22℃成胶速度会更快。如果到货情况正常,出现此种现象应该是融化操作不规范或者融化期间环境温度升高导致部分凝胶。请一定严格按照融化操作规范执行,确保融化时保持低温环境。
⚑ 如何稀释Matrigel?
一般可用预冷的无血清培养基或pH7.4的PBS稀释。由于批次之间的浓度差异,除354277外,推荐按照特定的工作终浓度稀释,而不要以比例或稀释倍数稀释。
⚑ Matrigel使用浓度?
凝胶浓度:在需要Matrigel凝胶的实验中,工作浓度需大于3 mg/mL
包被浓度:包被实验时Matrigel无需成胶,因此包被浓度应小于凝胶浓度(即3mg/mL)
工作浓度需要根据具体的细胞类型进行预实验测试。对于侵袭实验,建议初始浓度设置在200-300 μg/mL之间,再根据特定的实验体系进行优化
血管生成实验浓度:请务必使用大于10 mg/mL的Matrigel产品,康宁提供挑选批次和批次预留的服务,请您在订购产品时向代理商说明您的要求
体内皮下注射实验浓度:由于是体内实验,为了避免成胶不wan全,建议终浓度在4 mg/mL以上。
⚑ 使用Matrigel时需要注意哪些方面?
所有接触Matrigel的试剂耗材产品都需要预冷,操作过程应全程在冰上操作,确保低温环境。Matrigel对温度十分敏感,一旦超过10℃,即开始凝胶。以下图片可供参考:
⚑ 如何区别包被和凝胶?
包被指Matrigel浓度小于成胶浓度(即<3 mg/mL),在细胞培养器皿表面形成薄薄的蛋白层而不凝成胶冻状物质;凝胶指Matrigel浓度大于等于成胶浓度(即≥3 mg/mL),在细胞培养器皿表面能够形成胶冻状物质。
康宁基质胶代理——天津益元利康生物科技有限公司,为您提供康宁Corning耗材。如移液枪、锥形瓶、48孔板、Matrige基底膜基质等实验耗材,更多产品,欢迎咨询!
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