瞬时转染和稳定转染常见误区

　　误区一：稳定转染目的基因会整合到染色体，瞬时转染不会
 

　　这个答案是否定的，因为无论是瞬时转染还是稳定转染，DNA都会被引入细胞核并以一定的概率随机地整合到宿主染色体；差别在于，稳定转染所使用的质粒含有抗性基因，随后通过药物筛选，将未转入目的基因的细胞消除，留下的则是成功转入目的基因的细胞，因此经过一段时间的药物筛选，留存下来的细胞都是能够稳定传递的细胞，称之为稳定转染；而瞬时转染由于缺乏药物压力筛选，再加上只有少量细胞中有目的基因整合到染色体，因此在传代过程中，阳性细胞会逐渐减少，导致表达量逐渐降低，最终无法长期稳定表达。
 

　　误区二：只有慢病毒感染才能构建稳转细胞株
 

　　可以用来进行快速转染的转染方法，同样适用于构建稳定的细胞株，例如电穿孔法、化学试剂转染和慢病毒感染等。只是这三种转染方法在具体应用上可能会有一些差异。需要特别注意的是，在进行RNA转染时，由于RNA不需要进入细胞核，因此通常只用于短期转染表达。
 

　　误区三：构建稳转细胞株费时费力，周期长，不确定性高，常规实验室不方便构建
 

　　细胞株构建需要通过药物加压筛选，与瞬转相比周期长，但在进行科学研究时，确定了一个长期研究的靶标，后续都会针对某一基因进行相关实验，那么这个时候构建稳转细胞株就显得尤为必要，毕竟细胞株相较于瞬转来说，最大的优点就是表达稳定性高，批间差异小，实验结果可靠性更高。
 

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